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[交流]
【交流】生物样品分析-求助
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| 我最近尝试在建立一个新化合物的生物样品分析方法（该化合物为中性化合物），DAD检测器，AGILENT的Eclipse C18柱（4.6×150mm，5um），该化合物302nm处有最大吸收，流动相甲醇：水=72：28，流速1ml/min，化合物在7.008min出峰，空白血浆经正己烷、环己烷、乙醚液液提取后，流动相复溶解进样分析，发现在7.016min处有内源性杂质峰出现，也就是说血浆中杂质与我的目标化合物在这个流动相条件分不开，但现在不知道怎么优化条件，请大侠们帮忙指点，不胜感激！ |
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bbb555151617
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2楼2009-11-11 11:04:20
ronaldoli198311
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3楼2009-11-11 21:05:24
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谢谢bbb555151617和 ronaldoli198311 的热心解答，我可以确定干扰物是血浆中的，因为同时考察过正己烷、环己烷、乙醚、二氯甲烷空白溶剂，溶剂中是没有干扰的。试过甲醇和乙腈直接沉淀蛋白的方法，最低定量限只能到100ng/ml。所以还是希望用液液提取的样品处理方法。 这两天也在试着调节流动相的PH值，我现在只调了pH5.0和4.0的乙酸胺/乙酸缓冲液，发现我的目标化合物及干扰峰对pH值均不敏感，所以还是了换检测波长，我的目标化合物损失了30%的吸收强度，但基本上可以把干扰排除掉了，这样下来，最低定量限只能到40ng/ml。 各位觉得我还有必要试流动相调碱性么？ |
4楼2009-11-13 18:47:16
