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亭子123

铁虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切问题 已有1人参与

各位大佬们:我想构建一个双酶切的载体 两个酶切的位点很近,相差六个碱基 一起酶切会有影响吗???
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科研检测交流

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

两个酶切位点相差 6 个碱基,一起酶切大概率有影响(酶识别 / 结合会相互干扰,可能切不开或效率极低),建议先单酶切其中一个、回收后再单酶切另一个,或换酶切位点间距≥10bp 的载体~
2楼2025-12-12 11:01:17
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