24小时热门版块排行榜    

查看: 535  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

plf0717

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】毛细管电泳。。蛋白质标记

各位,
用标记物对蛋白质进行标记时常用EDC和NHS,
有文献标记方法如下:1、先配标记液 标记物+EDC+NHS 2、用标记液对蛋白进行标记。
我欲用胺类物质标记蛋白

个人现有疑问:EDC作为交联剂,主要使氨基和羧基聚合,如果标记液中EDC过量的话,再用其标记蛋白质,同时应该会使蛋白质自身的氨基和羧基发生聚合反应而降低标记效率,那有什么办法可以消除这种影响呢?希望大家指导!谢谢。

顺便有啥好的标记方法请提供参考!再次感谢!

[ Last edited by plf0717 on 2009-11-10 at 17:39 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plf0717

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gaoyuling at 2009-11-11 17:40:
各个物质之间的比例您用的是多少?

看有文献直接给1:1:1的比例。

1mg含1羧基的胺,1mg EDC,1mg NHS,
5楼2009-11-11 20:34:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

gaoyuling

铜虫 (正式写手)

★ ★
yensh(金币+2,VIP+0):thanks, 11-11 08:31
建议在其他条件不变的情况下,只改变交联剂的量,有谱图可以选出最佳的量,这样交联剂的最佳量值就可以确定下来了!
2楼2009-11-11 08:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plf0717

金虫 (小有名气)

先配标记液:胺+EDC+NHS,再加入标记液至含蛋白的缓冲液中反应,

但实验多次,ce中一直检测不到标记蛋白的信号!

个人觉得是没有标记上,请问大家标记蛋白需注意哪些细节问题呢?
3楼2009-11-11 14:32:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyuling

铜虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 11-15 19:31
各个物质之间的比例您用的是多少?
4楼2009-11-11 17:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不应该看fileCode +4 且听虎啸 2026-08-12 4/200 2026-08-12 12:40 by 行无人
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 19/950 2026-08-12 10:55 by 要乐观耀哥
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见