应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】毛细管电泳。。蛋白质标记
71/1返回列表
查看: 582  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

plf0717

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】毛细管电泳。。蛋白质标记

各位，
用标记物对蛋白质进行标记时常用EDC和NHS，
有文献标记方法如下：1、先配标记液 标记物+EDC+NHS 2、用标记液对蛋白进行标记。
我欲用胺类物质标记蛋白

个人现有疑问：EDC作为交联剂，主要使氨基和羧基聚合，如果标记液中EDC过量的话，再用其标记蛋白质，同时应该会使蛋白质自身的氨基和羧基发生聚合反应而降低标记效率，那有什么办法可以消除这种影响呢？希望大家指导！谢谢。

顺便有啥好的标记方法请提供参考！再次感谢！

[ Last edited by plf0717 on 2009-11-10 at 17:39 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-10 17:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyuling

铜虫 (正式写手)
★ ★
yensh(金币+2,VIP+0):thanks, 11-11 08:31
建议在其他条件不变的情况下，只改变交联剂的量，有谱图可以选出最佳的量，这样交联剂的最佳量值就可以确定下来了！
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-11-11 08:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plf0717

金虫 (小有名气)
先配标记液：胺+EDC+NHS,再加入标记液至含蛋白的缓冲液中反应，

但实验多次，ce中一直检测不到标记蛋白的信号！

个人觉得是没有标记上，请问大家标记蛋白需注意哪些细节问题呢？
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-11 14:32:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyuling

铜虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 11-15 19:31
各个物质之间的比例您用的是多少？
赞一下(11人) 回复此楼
4楼2009-11-11 17:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plf0717

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyuling at 2009-11-11 17:40:
各个物质之间的比例您用的是多少？

看有文献直接给1：1：1的比例。

1mg含1羧基的胺，1mg EDC，1mg NHS，
赞一下 回复此楼
5楼2009-11-11 20:34:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyuling

铜虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1,VIP+0):^_^欢迎常来分析版 11-13 14:43
自己认为是没有标记上是么？你可以加大一下交联剂的量在试试看效果怎么样！
赞一下(7人) 回复此楼
6楼2009-11-13 13:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plf0717

金虫 (小有名气)
★
opq691(金币+1,VIP+0):交流奖励 11-15 19:31
引用回帖:
Originally posted by gaoyuling at 2009-11-13 13:00:
自己认为是没有标记上是么？你可以加大一下交联剂的量在试试看效果怎么样！

加大交联剂的用量还是没效果。

另外，交联剂过量的话标记液加入到蛋白里面会使蛋白质缩合的。
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2009-11-15 19:13:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 plf0717 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 17:01 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 7/350 2026-11-01 16:58 by BCdvBAEpt3zm
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 16:58 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 22/1100 2026-11-01 16:35 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-01 15:04 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 15:04 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 6/300 2026-11-01 15:01 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 10/500 2026-11-01 14:50 by BCdvBAEpt3zm
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 14:48 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 14:37 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 17/850 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 15/750 2026-11-01 12:11 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-11-01 12:11 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 10:43 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 10:27 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
[考博] 申博求助 20+3 Katrinae 2026-10-26 4/200 2026-10-27 09:56 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭