应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » western出怪了
101/1返回列表
查看: 735  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

小虫子3198

铜虫 (小有名气)

[交流] western出怪了

最近做western转膜的时候
总是转不上去
而且转后的膜上，胶上和垫纸板上都没有任何东西
奇怪东西哪儿去了
我用的PVDF膜，15V/50min
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-10 16:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

断弦的琴

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你应该给出详细资料 比如蛋白多大
用的什么Marker。  或者你是从什么结果得出你转魔失败？
赞一下(1人) 回复此楼
不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
2楼2009-11-10 16:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
引用回帖:
Originally posted by 小虫子3198 at 2009-11-10 16:28:
最近做western转膜的时候
总是转不上去
而且转后的膜上，胶上和垫纸板上都没有任何东西
奇怪东西哪儿去了
我用的PVDF膜，15V/50min

转膜不能完全照搬别人的转膜条件的，不同的仪器，不同的蛋白都不一样，建议你根据自己的样品一系列对照摸一摸条件。
赞一下 回复此楼
可以用QQ找我……
3楼2009-11-10 16:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mourning

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
buffer有没用错？干转半干还是湿转？电及有没反？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-11-10 16:54:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
没活化膜？
回复此楼
5楼2009-11-10 19:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子3198

铜虫 (小有名气)
关键这是我们实验室成熟的条件，过去都好好的
郁闷之极啊
接着努力
赞一下 回复此楼
6楼2009-11-10 21:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我碰到过楼主这样的问题，也是用PVDF膜预染MARKER转完膜之后既没在膜上也没在胶上就那么没了，我后来总结的原因是PVDF膜过期了，因为相同的条件NC膜转的很好。
另外可能的原因：PVDF膜必须用纯甲醇浸泡一下（至少要用纯甲醇润湿），而且避免在试验结束前再次变干。

把转膜后的胶考染一下，看看蛋白是不是还在胶上。
PVDF膜转穿的可能性不大，只要你的蛋白不是太小（20KD以下）。
注意转膜时的放热问题，最好4度冰箱或者用冰。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2009-11-10 22:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡中一

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们实验室都是用的NC膜，电转的用的恒流，小分子的一般180A一个小时
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2009-11-10 23:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mcl49510

铜虫 (小有名气)
不是蛋白被水解了吧？
赞一下 回复此楼
9楼2009-11-11 01:44:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

davidck

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用prestain的蛋白maker，到时候转完了就能知道蛋白是不是转到膜上了
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-11-11 02:02:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小虫子3198 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 071000生物学，一志愿深圳大学296分，求调剂 +13 TIckLw 2026-04-06 14/700 2026-04-13 08:49 by 可淡不可忘
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-12 12/600 2026-04-13 08:49 by Sammy2
[考研] 335求调剂 +16 想上岸呀！！ 2026-04-12 16/800 2026-04-13 08:41 by Sammy2
[考研] 279求调剂 +9 张番茄不炒蛋 2026-04-11 9/450 2026-04-12 22:22 by paopaotu326
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +22 好好休息好不好 2026-04-09 25/1250 2026-04-12 17:09 by ajpv风雷
[考研] 085600材料与化工，求调剂 +12 won_qii 2026-04-07 12/600 2026-04-12 17:02 by lhj2009
[考研] 求助调剂，跨调 +12 X十甫寸Y 2026-04-11 12/600 2026-04-12 10:20 by zhouyuwinner
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 初试分332，一志愿报考西北工业大学， +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +10 池池池池池池 2026-04-08 10/500 2026-04-09 17:10 by 独醉梦孤城
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭