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evoforever铁虫 (小有名气)
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[交流]
请问：如何去除total RNA中的钉子DNA?
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由于要做RT-PCR，我们用Trizol提的细菌total RNA，但是分别用NEB, Promeg和TaKaRa的无RNAase的DNAase处理后，样品做普通PCR都能扩出阳性的条带来（负对照的水没有），说明DNA除不干净（但用总DNA做对照发现DNAase活性都还是很好的）。感觉头都大了。 据说细菌的total RNA确实很难除DNA，大家都有什么好的办法请给个建议。谢了先！！ [ Last edited by 350784478 on 2009-11-14 at 11:57 ] |
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ljwei_163
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3楼2009-11-10 16:29:54
红多多
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一般都是加DNase处理DNA 你用DNase处理DNA以后处理了DNase没有啊？不处理的话cDNA就完了…… 处理DNase可以用酚抽提法，麻烦，RNA回收率低。我们实验室用的就是E.Z.N.A. TM Total RNA Kit 效果还可以。那个试剂盒的说明书上说EDTA高温灭菌也可以，没玩过，不予评价 附上说明书 http://www.omegabiotek.com.cn/ok ... 071211144441109.pdf |
2楼2009-11-10 16:00:16
evoforever
铁虫 (小有名气)
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