应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR的操作问题！
201/2返回列表12下一页
查看: 1441  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

churmi

银虫 (正式写手)

[交流] PCR的操作问题！

想问问大侠：
      PCR的操作过程中一下步骤是必须得吗？
   1. 在超净台内完成？
   2. 从-20度取出的水，buffer，dNTP都必须放在冰上溶解；并持续到整个加样结束？

   谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-09 21:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-10 09:28
churmi(金币+1,VIP+0): 11-11 08:45
churmi(金币+1,VIP+0): 11-11 08:45
看你做什么东西的嘛  常规的不用在无菌条件下做啊  我有时候枪头都不灭菌
酶有必要在低温下保存 至于操作完全没有必要在低温下操作
赞一下(21人) 回复此楼
可以用QQ找我……
2楼2009-11-09 21:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diaoyuhua

金虫 (小有名气)
★
churmi(金币+1,VIP+0): 11-11 08:45
不需要，dntp要从冰箱中取出其他可常温操作！
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-09 21:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小豆豆

金虫 (小有名气)
不用，温度只要不是太高，就不用在冰上操作。
赞一下 回复此楼
4楼2009-11-09 21:49:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wish0310

至尊木虫 (著名写手)
在超净台上是必须的，因为要保证无杂dna混入，但第二种步骤就不必了,可常温操作的
赞一下 回复此楼
5楼2009-11-09 22:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by churmi at 2009-11-9 21:22:
想问问大侠：
      PCR的操作过程中一下步骤是必须得吗？
   1. 在超净台内完成？
   2. 从-20度取出的水，buffer，dNTP都必须放在冰上溶解；并持续到整个加样结束？

   谢了！

都不需要，但是酶必须要放在冰盒上。
赞一下 回复此楼
6楼2009-11-09 22:36:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

断弦的琴

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
amisking(金币+4,VIP+0): 11-10 09:28
to 1:
如果是要做阳性鉴定,建议超净台.
如果是单单做亚克隆,可以在实验台操作.
因为操作时间如果比较长超静台的风会 让你的PCR体系中的水分挥发,导致体系缩小影响实验.
to: 2
dNTP一定在要冰上溶解. 水肯定不用,不是混合物. buffer如果不是很着急的话,最好也在冰上操作. 毕竟实验仔细后,即使出了问题也好分析.
赞一下(20人) 回复此楼
不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
7楼2009-11-10 08:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)
除非是怕污染的材料，不需要在超净台完成

水也不需要-20了，
酶必须放冰上而且离开冰箱的时间越短越好
其他的尽量在冰上呗
赞一下 回复此楼
8楼2009-11-10 09:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)
你用eastTaq之类的预混的吧，都不用，加入模板和引物即可
赞一下 回复此楼
致良知
9楼2009-11-10 09:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)
小可，每次操作尽量在超净台上。小可，认为，这样比较保险。虽然，在实验室（冰上操作）也能P出来，但心里总是怕出问题。
万一出问题，就说不清了。
小可，建议：尽是在超净台上、冰上操作，在冰上溶解。
赞一下 回复此楼
10楼2009-11-10 09:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 churmi 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 293求调剂 +12 zjl的号 2026-03-16 17/850 2026-03-22 16:51 by i_cooler
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666！
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭