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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR的操作问题！
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zhang35995

金虫 (正式写手)
理论上要
但是实际上 没有必要这么小心了的
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11楼2009-11-10 14:43:27
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zier1011

木虫 (著名写手)
1.一般的不用在超净台，
2.你要是加样快的话，就不用在冰上，但酶得保持低温。水似乎没那么严的要求，但你也不要用太高温度的水温，并且又在室温下操作，那样你的酶加进去的时候，你的体系温度会影响酶活性的
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花还香香的
12楼2009-11-10 15:26:10
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crab1983

铜虫 (小有名气)
★
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在我们的实验室做PCR的时候是在超净工作台进行的，PCR反应体系中的成分都是从-20中取出的，然后在冰上进行操作。反应体系中的成分放在冰上融化就行。做PCR一般都建议在冰上来加反应体系。
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13楼2009-11-11 09:31:19
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heismeng

金虫 (小有名气)
★
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不需要这么严格 酶一定要低温 可以在冰上做反应体系 但是没必要冰上解冻 个人认为
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14楼2009-11-11 11:05:40
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beisimai895

木虫 (小有名气)
★
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操作台上操作更好了，但事实上，如果不在操作上操作也是没问题的，至于那些反应组分，最好冰浴融化。
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15楼2009-11-11 11:18:56
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六妖妖

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看实验样品喽。有些特别的样品为了避免交叉污染还是在操作台上操作好。酶在-20度是不结冰的。不需要解冻。用的时候拿出来就行。其他的buffer和dNTP等，配样时只要不是太高温都行。
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16楼2009-11-12 10:32:06
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liuhua703

木虫 (正式写手)
★
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全部在冰上、在超净台内也不一定能P出来。都不在冰上也可能出来，分子很抽象，我全遇到过！！！！！！！！
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17楼2009-11-12 12:59:49
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ychh521

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
常规pcr技术很成熟的，不用那么麻烦，水放肆度就行，其他的放-20，拿出来后放桌子上溶解就行，枪头不用灭菌，不用在超净工作台。
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18楼2009-11-14 19:06:15
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hrbd1985

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
普通PCR没有特殊要求就不用在超净台中操作
我们操作是在冰上的，除了酶所有试剂置于冰上，都加好后，到冰箱取酶，加酶，防止酶失活
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19楼2009-11-14 21:52:53
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wuer413023

至尊木虫 (文坛精英)

没事领金币
批16s的还是小心点好
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上邪!我欲与君相知，长命无绝衰。山无陵，江水为竭，冬雷震震，夏雨雪，天地合，乃敢与君绝！
20楼2009-11-14 23:00:37
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