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美拉徳反应！opa法测游离氨基酸接枝度为负数已有3人参与
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我用的是酪蛋白-麦芽糖糊精作为接枝材料，用磷酸盐缓冲液（PH=7）控制酪蛋白含量2％，比例1：1，温度90°，水浴时间3h，反应后有明显褐色物质生成，用公式1-（反应前混合物吸光值/反应后复合物吸光值）计算出来的全都是负值。各种比例，蛋白含量，温度时间我都尝试了，opa溶液现配现用现测，避光也做了，其中opa100ml：opa固体80mg（2ml95％乙醇），5ml20％SDS，50ml硼酸缓冲液（ph=9.5），200ulβ-疏基乙醇，加去离子水至100ml。取稀释10倍200ul样液（2mg/ml）和4mlopa溶液反应测吸光值，测了两周了，各种稀释倍数都试过了，全都是反应后的吸光值更大，好迷茫，有大佬或者相关实验的兄弟姐妹告诉我有什么问题存在吗，该怎么改进啊，救救孩子！ @lovibond 发自小木虫手机客户端 |
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