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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 美拉徳反应！opa法测游离氨基酸接枝度为负数
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业莲11

新虫 (初入文坛)

[求助] 美拉徳反应！opa法测游离氨基酸接枝度为负数 已有3人参与

我用的是酪蛋白-麦芽糖糊精作为接枝材料，用磷酸盐缓冲液（PH=7）控制酪蛋白含量2％，比例1：1，温度90°，水浴时间3h，反应后有明显褐色物质生成，用公式1-（反应前混合物吸光值/反应后复合物吸光值）计算出来的全都是负值。各种比例，蛋白含量，温度时间我都尝试了，opa溶液现配现用现测，避光也做了，其中opa100ml：opa固体80mg（2ml95％乙醇），5ml20％SDS，50ml硼酸缓冲液（ph=9.5），200ulβ-疏基乙醇，加去离子水至100ml。取稀释10倍200ul样液（2mg/ml）和4mlopa溶液反应测吸光值，测了两周了，各种稀释倍数都试过了，全都是反应后的吸光值更大，好迷茫，有大佬或者相关实验的兄弟姐妹告诉我有什么问题存在吗，该怎么改进啊，救救孩子！
@lovibond 发自小木虫手机客户端
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1楼 2025-08-03 15:14:45
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Jackson1788

铁杆木虫 (正式写手)

GG

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
冻干之后测一下，溶液测的不准。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
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业莲11
2楼2025-08-03 15:29:47
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qingshan710

发自小木虫手机客户端
3楼2025-08-06 18:37:45
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业莲11

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by jacson1879 at 2025-08-03 15:29:47
冻干之后测一下，溶液测的不准。

感谢大佬，吸光值正常了，但冻干后样品的褐变值也变低了许多，这个会有影响吗
发自小木虫手机客户端
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4楼2025-08-07 14:34:03
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sheppard

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 业莲11 at 2025-08-07 14:34:03
感谢大佬，吸光值正常了，但冻干后样品的褐变值也变低了许多，这个会有影响吗
...

结论往往是比较出来的，跟你设定对照组、对比对象组的结果比，看有无差异，是否符合自己假说。
赞一下 回复此楼
5楼2025-09-01 14:35:22
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科研检测交流

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看看是不是OPA法测定干扰‌ 或 ‌反应体系设计问题
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6楼2025-09-05 11:26:39
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