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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白表达温度问题
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keer881

[交流] 蛋白表达温度问题

为何蛋白必须低温诱导才能表达 ？具体原理是什么？
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1楼 2009-11-08 19:56:56
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 11-8 22:09
不知道你是指什么
在我们组，一般的可溶性蛋白表达并不需要低温诱导；但是如果你得到的蛋白可溶性不高或者根本在PAGE上看不到显著的蛋白条带；那才采用低温诱导，减低诱导剂用量等策略

据说当细胞的生长速率低的时候，有利于蛋白质充分折叠；而更低的蛋白量也保证该蛋白在细胞内的折叠或减低对宿主的毒性！
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致良知
2楼2009-11-08 22:06:26
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
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引用回帖:
Originally posted by quiller2000 at 2009-11-8 22:06:
不知道你是指什么
在我们组，一般的可溶性蛋白表达并不需要低温诱导；但是如果你得到的蛋白可溶性不高或者根本在PAGE上看不到显著的蛋白条带；那才采用低温诱导，减低诱导剂用量等策略

据说当细胞的生长速率低 ...

有点意思
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小木虫之有关部门负责人
3楼2009-11-08 22:18:10
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wish0310

至尊木虫 (著名写手)
★
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大多数情况下是不必的，但是有些蛋白折叠问题比较多，最好低温表达。但还请楼主注意，要知道此分泌蛋白是胞内蛋白还是胞外蛋白？也就是说，表达出来有没有包涵体
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4楼2009-11-08 22:55:50
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xiaoyin140

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很高深的问题 向大家学习
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5楼2009-11-08 23:03:16
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
引用回帖:
Originally posted by wish0310 at 2009-11-8 22:55:
大多数情况下是不必的，但是有些蛋白折叠问题比较多，最好低温表达。但还请楼主注意，要知道此分泌蛋白是胞内蛋白还是胞外蛋白？也就是说，表达出来有没有包涵体

高手啊~
蛋白表达似乎很高深~影响因素很多，学习了
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小木虫之有关部门负责人
6楼2009-11-08 23:24:37
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
我听谁说的低温下 mRNA更稳定  表达量相应高吧
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
7楼2009-11-09 00:36:52
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kitty8682

金虫 (正式写手)
学习了
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8楼2009-11-09 08:43:17
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keer881

我是用大肠杆菌PET-28a表达的重组蛋白，带有His标签。用BL21不能表达，只能在Rosseta中的表达，表达时我做过几个温度，37度和30 度都不表达，只能25度过夜才能表达。表达量一般，超声后位于上清。我知道一般表达量很高，位于沉淀的蛋白为了减慢折叠速度才低温诱导，为什么我的只有低温才能表达呢？谢谢
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9楼2009-11-18 21:13:57
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刘敬功

银虫 (小有名气)
应该不用低温的
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10楼2010-03-07 16:42:41
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