24小时热门版块排行榜    

查看: 1001  |  回复: 6
当前主题已经存档。

2004371310

木虫 (著名写手)

[交流] PET载体诱导蛋白表达时用的温度

本人现在想用PET-32a(+)载体诱导一个蛋白进行表达,不知道应该用什么温度来诱导呢,请各位做过此类实验的高手指教一下!另外也想问一下应使用什么浓度的IPTG来诱导。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做过29a,30度诱导,IPTG1umol
小木虫之有关部门负责人
2楼2009-11-07 23:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你可以做一个温度试验啊,选择不同温度来进行诱导,然后SDS-PAGE分析,IPTG终浓度可以用1mM的
I am not a hero , but I served with heroes!
3楼2009-11-08 08:51:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenqicc

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
温度不一定的,诱导大多数是低温诱导,25度、30度都可能,但也有情况是37乃至更高,最好像LS那位说的,做个温度梯度实验后用SDS或者测定酶活力来鉴定,有时还会需要变温控制;IPTG一般1mM,但是若想确定最佳浓度也需做浓度梯度实验。
Publish OR Perish!
4楼2009-11-08 09:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houcaixia

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不知道你做的是什么基因的,我们做了一个旋转正交试验,温度在28-32度时的酶活相对较高,你可以试验一下。
5楼2009-11-08 09:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangguoliguo

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们实验室也用PET-32a(+)载体诱导棉花纤维蛋白的表达,37°C恒温诱导
IPTG母液浓度为24mg/mL,诱导时往100mL LB培养基中加入20微升即可
天行健,君子以自强不息地势坤,君子以厚德载物
6楼2009-11-08 09:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

7楼2009-11-08 09:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2004371310 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
信息提示
请填处理意见