应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PET载体诱导蛋白表达时用的温度
71/1返回列表
查看: 906  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

2004371310

木虫 (著名写手)

[交流] PET载体诱导蛋白表达时用的温度

本人现在想用PET-32a(+)载体诱导一个蛋白进行表达,不知道应该用什么温度来诱导呢，请各位做过此类实验的高手指教一下！另外也想问一下应使用什么浓度的IPTG来诱导。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-07 23:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做过29a，30度诱导，IPTG1umol
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
2楼2009-11-07 23:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以做一个温度试验啊，选择不同温度来进行诱导，然后SDS-PAGE分析，IPTG终浓度可以用1mM的
赞一下(1人) 回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes！
3楼2009-11-08 08:51:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenqicc

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
温度不一定的，诱导大多数是低温诱导，25度、30度都可能，但也有情况是37乃至更高，最好像LS那位说的，做个温度梯度实验后用SDS或者测定酶活力来鉴定，有时还会需要变温控制；IPTG一般1mM，但是若想确定最佳浓度也需做浓度梯度实验。
赞一下(1人) 回复此楼
Publish OR Perish!
4楼2009-11-08 09:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houcaixia

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道你做的是什么基因的，我们做了一个旋转正交试验，温度在28-32度时的酶活相对较高，你可以试验一下。
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2009-11-08 09:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangguoliguo

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们实验室也用PET-32a(+)载体诱导棉花纤维蛋白的表达，37°C恒温诱导
IPTG母液浓度为24mg/mL，诱导时往100mL LB培养基中加入20微升即可
赞一下(1人) 回复此楼
天行健，君子以自强不息地势坤，君子以厚德载物
6楼2009-11-08 09:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)
28°C
回复此楼
7楼2009-11-08 09:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2004371310 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿085502，267分求调剂 +14 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 15/750 2026-04-12 22:33 by fqwang
[考研] 材料085601调剂 +27 何润采123 2026-04-10 29/1450 2026-04-12 22:31 by fqwang
[考研] 调剂求收留 +29 果然有我 2026-04-10 30/1500 2026-04-12 22:14 by zxcwyt
[考研] 一志愿安大生物学07初试322、本科二本、调剂求助 +9 李多米lee. 2026-04-12 10/500 2026-04-12 22:10 by 独醉梦孤城
[考研] 复试调剂 +14 积极向上； 2026-04-10 16/800 2026-04-12 20:02 by gruyclewee
[考研] 求助调剂，跨调 +12 X十甫寸Y 2026-04-11 12/600 2026-04-12 10:20 by zhouyuwinner
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +12 振—TZ 2026-04-10 12/600 2026-04-12 07:54 by wj165256
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +20 慕绝cc 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 10:22 by xujun0624
[考研] 347材料专硕求调剂 +19 zj8215216 2026-04-06 19/950 2026-04-10 09:36 by 690616278
[考研] 349学科化学045106求调剂，化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +3 慕绝cc 2026-04-09 3/150 2026-04-09 09:57 by liuhuiying09
[考研] 计算机11408 287 求调剂 +3 LiLe5 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:15 by shanqishi
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭