应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PET载体诱导蛋白表达时用的温度
71/1返回列表
查看: 866  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

2004371310

木虫 (著名写手)

[交流] PET载体诱导蛋白表达时用的温度

本人现在想用PET-32a(+)载体诱导一个蛋白进行表达,不知道应该用什么温度来诱导呢，请各位做过此类实验的高手指教一下！另外也想问一下应使用什么浓度的IPTG来诱导。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-07 23:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做过29a，30度诱导，IPTG1umol
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
2楼2009-11-07 23:03:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以做一个温度试验啊，选择不同温度来进行诱导，然后SDS-PAGE分析，IPTG终浓度可以用1mM的
赞一下(1人) 回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes！
3楼2009-11-08 08:51:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenqicc

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
温度不一定的，诱导大多数是低温诱导，25度、30度都可能，但也有情况是37乃至更高，最好像LS那位说的，做个温度梯度实验后用SDS或者测定酶活力来鉴定，有时还会需要变温控制；IPTG一般1mM，但是若想确定最佳浓度也需做浓度梯度实验。
赞一下(1人) 回复此楼
Publish OR Perish!
4楼2009-11-08 09:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houcaixia

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知道你做的是什么基因的，我们做了一个旋转正交试验，温度在28-32度时的酶活相对较高，你可以试验一下。
赞一下(3人) 回复此楼
5楼2009-11-08 09:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangguoliguo

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们实验室也用PET-32a(+)载体诱导棉花纤维蛋白的表达，37°C恒温诱导
IPTG母液浓度为24mg/mL，诱导时往100mL LB培养基中加入20微升即可
赞一下(1人) 回复此楼
天行健，君子以自强不息地势坤，君子以厚德载物
6楼2009-11-08 09:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)
28°C
回复此楼
7楼2009-11-08 09:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2004371310 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 350求调剂 +6 weudhdk 2026-03-19 6/300 2026-03-23 15:47 by tangyuan0840221
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +4 niko- 2026-03-22 4/200 2026-03-23 07:56 by Iveryant
[考研] 307求调剂 +11 冷笙123 2026-03-17 11/550 2026-03-22 20:16 by edmund7
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭