24小时热门版块排行榜    

查看: 616  |  回复: 6
当前主题已经存档。

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

[交流] 关于处理的重复问题

最近很困惑,求解!
    试验设计采用的是随机区组设计,设计了3个重复,取样的时候是分开取的,提DNA也是分开提的,现在需要定量PCR,发现如果每个DNA只做一管误差太大,每个DNA都做3次重复,成本太高了,时间也多很多!现在想请教高手,能不能把重复间的DNA混合,然后用混匀后的DNA做3个重复?
     小弟做的是土壤微生物,在纯培养的过程中也有同样的困惑,烦恼中,请大家帮忙!
回复此楼
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):多谢 11-15 21:34
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 16:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 16:26:
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?

非常感谢您的指教,实际上要证明仪器的好坏和加样的水平不用混合也完全可以证明,关键是重复间的差异太大了,重复间的差异有时候比处理间还大多了,我的目的是比较不同处理间基因拷贝数的差异。
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
3楼2009-11-06 17:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nsa0804

木虫 (正式写手)

★ ★
germ2010(金币+2,VIP+0):谢谢 11-15 21:34
不行的~~~ 这样你的区组间重复就没有意义了
努力使自己改变这世上唯一不变的就是变
4楼2009-11-06 17:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):非常感谢您的指教,谢谢 11-15 21:35
小可,最近也想做PR-PCR,针对你的情况,小可认为不可取。有些时候,确实处理间差异比重复间还大。在重复时,设计最少3个。最好是4个了,如果有1个偏差太大,是可以舍去的。虽然成本高了,但实验结果是可信的。
和老板说说,多做几个重复吧。 祝好运。
5楼2009-11-06 17:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by nsa0804 at 2009-11-6 17:13:
不行的~~~ 这样你的区组间重复就没有意义了

谢谢您的指教,有时候看外文文献也有人混合的,并且影响因子还比较高,
但是我讲不出混合有什么依据,
如果不混,工作量好大,结果太差还不能进行分析处理,郁闷中............要毕业啊,惨
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
6楼2009-11-06 17:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by cato8163 at 2009-11-6 17:14:
小可,最近也想做PR-PCR,针对你的情况,小可认为不可取。有些时候,确实处理间差异比重复间还大。在重复时,设计最少3个。最好是4个了,如果有1个偏差太大,是可以舍去的。虽然成本高了,但实验结果是可信的。
...

谢谢您的指教,最好当然是不混合,但是,要毕业啊,要数据啊,郁闷..........
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
7楼2009-11-06 17:21:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 germ2010 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +21 医学老男孩 2026-08-13 47/2350 2026-08-14 17:26 by gdd2018
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见