24小时热门版块排行榜    

查看: 614  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

[交流] 关于处理的重复问题

最近很困惑,求解!
    试验设计采用的是随机区组设计,设计了3个重复,取样的时候是分开取的,提DNA也是分开提的,现在需要定量PCR,发现如果每个DNA只做一管误差太大,每个DNA都做3次重复,成本太高了,时间也多很多!现在想请教高手,能不能把重复间的DNA混合,然后用混匀后的DNA做3个重复?
     小弟做的是土壤微生物,在纯培养的过程中也有同样的困惑,烦恼中,请大家帮忙!
回复此楼
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by cato8163 at 2009-11-6 17:14:
小可,最近也想做PR-PCR,针对你的情况,小可认为不可取。有些时候,确实处理间差异比重复间还大。在重复时,设计最少3个。最好是4个了,如果有1个偏差太大,是可以舍去的。虽然成本高了,但实验结果是可信的。
...

谢谢您的指教,最好当然是不混合,但是,要毕业啊,要数据啊,郁闷..........
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
7楼2009-11-06 17:21:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):多谢 11-15 21:34
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 16:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 16:26:
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?

非常感谢您的指教,实际上要证明仪器的好坏和加样的水平不用混合也完全可以证明,关键是重复间的差异太大了,重复间的差异有时候比处理间还大多了,我的目的是比较不同处理间基因拷贝数的差异。
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
3楼2009-11-06 17:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nsa0804

木虫 (正式写手)

★ ★
germ2010(金币+2,VIP+0):谢谢 11-15 21:34
不行的~~~ 这样你的区组间重复就没有意义了
努力使自己改变这世上唯一不变的就是变
4楼2009-11-06 17:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见