24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 536  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

[交流] 关于处理的重复问题

最近很困惑,求解!
    试验设计采用的是随机区组设计,设计了3个重复,取样的时候是分开取的,提DNA也是分开提的,现在需要定量PCR,发现如果每个DNA只做一管误差太大,每个DNA都做3次重复,成本太高了,时间也多很多!现在想请教高手,能不能把重复间的DNA混合,然后用混匀后的DNA做3个重复?
     小弟做的是土壤微生物,在纯培养的过程中也有同样的困惑,烦恼中,请大家帮忙!
回复此楼

» 猜你喜欢

路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):非常感谢您的指教,谢谢 11-15 21:35
小可,最近也想做PR-PCR,针对你的情况,小可认为不可取。有些时候,确实处理间差异比重复间还大。在重复时,设计最少3个。最好是4个了,如果有1个偏差太大,是可以舍去的。虽然成本高了,但实验结果是可信的。
和老板说说,多做几个重复吧。 祝好运。
5楼2009-11-06 17:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):多谢 11-15 21:34
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 16:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 16:26:
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?

非常感谢您的指教,实际上要证明仪器的好坏和加样的水平不用混合也完全可以证明,关键是重复间的差异太大了,重复间的差异有时候比处理间还大多了,我的目的是比较不同处理间基因拷贝数的差异。
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
3楼2009-11-06 17:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nsa0804

木虫 (正式写手)

★ ★
germ2010(金币+2,VIP+0):谢谢 11-15 21:34
不行的~~~ 这样你的区组间重复就没有意义了
努力使自己改变这世上唯一不变的就是变
4楼2009-11-06 17:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学070300 求调剂 +16 哈哈哈^_^ 2026-04-12 16/800 2026-04-13 00:17 by wadb64
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +14 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 15/750 2026-04-12 22:33 by fqwang
[考研] 22408 352分求调剂 +5 努力的夏末 2026-04-09 5/250 2026-04-12 19:17 by wj165256
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +12 won_qii 2026-04-07 12/600 2026-04-12 17:02 by lhj2009
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 269求调剂 +11 啊啊我我 2026-04-07 11/550 2026-04-11 16:45 by vgtyfty
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 273求调剂 +51 麦小叮当 2026-04-06 58/2900 2026-04-10 15:54 by jiajinhpu
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 071000生物学,一志愿深圳大学296分,求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见