24小时热门版块排行榜    

查看: 516  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

[交流] 关于处理的重复问题

最近很困惑,求解!
    试验设计采用的是随机区组设计,设计了3个重复,取样的时候是分开取的,提DNA也是分开提的,现在需要定量PCR,发现如果每个DNA只做一管误差太大,每个DNA都做3次重复,成本太高了,时间也多很多!现在想请教高手,能不能把重复间的DNA混合,然后用混匀后的DNA做3个重复?
     小弟做的是土壤微生物,在纯培养的过程中也有同样的困惑,烦恼中,请大家帮忙!
回复此楼

» 猜你喜欢

路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):非常感谢您的指教,谢谢 11-15 21:35
小可,最近也想做PR-PCR,针对你的情况,小可认为不可取。有些时候,确实处理间差异比重复间还大。在重复时,设计最少3个。最好是4个了,如果有1个偏差太大,是可以舍去的。虽然成本高了,但实验结果是可信的。
和老板说说,多做几个重复吧。 祝好运。
5楼2009-11-06 17:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

★ ★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-6 17:43
germ2010(金币+3,VIP+0):多谢 11-15 21:34
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?
可以用QQ找我……
2楼2009-11-06 16:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

germ2010

木虫 (正式写手)

Sustainability

引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-11-6 16:26:
我认为不能,如果混合了做三次RT-PCR得到的结果对比只能说明你仪器的好坏,或者你加样的水平。 你设置重复本来就是为了观测你样品的中某DNA含量是否平均,现在混合了,还怎么说明问题呢?

非常感谢您的指教,实际上要证明仪器的好坏和加样的水平不用混合也完全可以证明,关键是重复间的差异太大了,重复间的差异有时候比处理间还大多了,我的目的是比较不同处理间基因拷贝数的差异。
路虽遥行则必至!事虽难做则有成!努力奋斗!
3楼2009-11-06 17:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nsa0804

木虫 (正式写手)

★ ★
germ2010(金币+2,VIP+0):谢谢 11-15 21:34
不行的~~~ 这样你的区组间重复就没有意义了
努力使自己改变这世上唯一不变的就是变
4楼2009-11-06 17:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 3/150 2026-03-23 10:32 by Iveryant
[考研] 284求调剂 +6 Zhao anqi 2026-03-22 6/300 2026-03-23 09:23 by king123!
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
请填处理意见