24小时热门版块排行榜    

查看: 939  |  回复: 7
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

guojing0000

木虫 (小有名气)

[交流] 请教关于聚丙烯氨酰胺电泳的问题(非常紧急)

我现在做的是SDS-PAGE,但是出现了很多问题,想请教大家,
1. 分离胶中总是出现气泡,原来夏天做实验的时候没有出现这个问题,现在总是出现,想知道为什么
2. 胶凝的特别慢,看到有人说放到37摄氏度的培养箱中比较快,请问这样可以吗?
3. 还有最大的一个问题是我的胶总是凝了以后体积减少的特别多,本来梳子周围都铺满了胶,但是等到第二天胶总是体积减少很多很多,以至于梳子全部都露出来了
4. 我看到我这个分离胶中要添加6M的尿素,我想知道6M是个什么单位,什么意思啊?
期望各位高手多多给我指点,实在是感激不尽啊,在此先谢谢各位了,希望大家知无不言,言无不尽,谢啦!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小豆豆

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1. 出现气泡可能有两个原因,第一,版没有处理干净;第二,操作问题,配置溶液时尽量避免剧烈搅动,灌胶时注意不要引入气泡,实在不行,可以先将溶液抽空气后再使用。
2. 放到37度可以的。
3. 是不是空气干燥导致失水太多,注意避免失水,在37度不要放置太长时间,胶凝后可用保鲜膜包裹后保存于4度。
4. 6M=6mol/L,用于蛋白变性。
5楼2009-11-05 09:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+5,VIP+0): 11-5 12:26
1. 气泡,你是指在胶凝固的过程中出现的气泡,还是配胶的时候有气泡?如果是凝固时出现气泡,可能试剂有问题。配胶的时候有气泡没多大关系吧,用水封口的时候,这些气泡一般都会跑上来...
2. 凝胶慢,放培养箱也可以,或者稍微多加一点TEMED。
3. 胶体积减小...现在你那儿是不是特别干燥?如果是的话,胶配好以后最好用电泳缓冲液泡着,放四度冰箱里,可以保存一周左右,基本不受季节影响。
4. 6M 就是 6 mol/L 啦。

[ Last edited by holyala on 2009-11-5 at 09:32 ]
2楼2009-11-05 09:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水过无恒

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1.气泡多主要是因为板子没有洗干净,用SDS多洗几次吧。烘干再配胶

2. 胶凝的特别慢可能是APS(过硫酸铵)失效或者TMED时间放长失效,可以多加点TMED。放37度是可以加快凝胶

3.放一晚上了胶被体积减少很正常的,都慢慢被风干了啊。一般都是上层胶第二天才做的啊,晚上做了下层胶就用水封着过夜

4. 6Mol/ L啊,你难道跑小分子量的蛋白吗,如果不是加那玩意干嘛呢?
3楼2009-11-05 09:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

firefly75

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1. 出现气泡应该是操作问题哦,配置溶液时尽量避免剧烈搅动,灌胶时注意不要引入气泡,实在不行,可以先将溶液抽空气后再使用。
2. 放到37度可以的。
3. 是不是空气干燥导致失水太多,注意避免失水,在37度不要放置太长时间,胶凝后可用保鲜膜包裹后保存于4度。
4. 先汗下,6M=6mol/liter,用于蛋白变性。
4楼2009-11-05 09:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见