24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 839  |  回复: 7
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

guojing0000

木虫 (小有名气)

[交流] 请教关于聚丙烯氨酰胺电泳的问题(非常紧急)

我现在做的是SDS-PAGE,但是出现了很多问题,想请教大家,
1. 分离胶中总是出现气泡,原来夏天做实验的时候没有出现这个问题,现在总是出现,想知道为什么
2. 胶凝的特别慢,看到有人说放到37摄氏度的培养箱中比较快,请问这样可以吗?
3. 还有最大的一个问题是我的胶总是凝了以后体积减少的特别多,本来梳子周围都铺满了胶,但是等到第二天胶总是体积减少很多很多,以至于梳子全部都露出来了
4. 我看到我这个分离胶中要添加6M的尿素,我想知道6M是个什么单位,什么意思啊?
期望各位高手多多给我指点,实在是感激不尽啊,在此先谢谢各位了,希望大家知无不言,言无不尽,谢啦!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

firefly75

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1. 出现气泡应该是操作问题哦,配置溶液时尽量避免剧烈搅动,灌胶时注意不要引入气泡,实在不行,可以先将溶液抽空气后再使用。
2. 放到37度可以的。
3. 是不是空气干燥导致失水太多,注意避免失水,在37度不要放置太长时间,胶凝后可用保鲜膜包裹后保存于4度。
4. 先汗下,6M=6mol/liter,用于蛋白变性。
4楼2009-11-05 09:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+5,VIP+0): 11-5 12:26
1. 气泡,你是指在胶凝固的过程中出现的气泡,还是配胶的时候有气泡?如果是凝固时出现气泡,可能试剂有问题。配胶的时候有气泡没多大关系吧,用水封口的时候,这些气泡一般都会跑上来...
2. 凝胶慢,放培养箱也可以,或者稍微多加一点TEMED。
3. 胶体积减小...现在你那儿是不是特别干燥?如果是的话,胶配好以后最好用电泳缓冲液泡着,放四度冰箱里,可以保存一周左右,基本不受季节影响。
4. 6M 就是 6 mol/L 啦。

[ Last edited by holyala on 2009-11-5 at 09:32 ]
2楼2009-11-05 09:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水过无恒

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1.气泡多主要是因为板子没有洗干净,用SDS多洗几次吧。烘干再配胶

2. 胶凝的特别慢可能是APS(过硫酸铵)失效或者TMED时间放长失效,可以多加点TMED。放37度是可以加快凝胶

3.放一晚上了胶被体积减少很正常的,都慢慢被风干了啊。一般都是上层胶第二天才做的啊,晚上做了下层胶就用水封着过夜

4. 6Mol/ L啊,你难道跑小分子量的蛋白吗,如果不是加那玩意干嘛呢?
3楼2009-11-05 09:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小豆豆

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 11-5 12:26
1. 出现气泡可能有两个原因,第一,版没有处理干净;第二,操作问题,配置溶液时尽量避免剧烈搅动,灌胶时注意不要引入气泡,实在不行,可以先将溶液抽空气后再使用。
2. 放到37度可以的。
3. 是不是空气干燥导致失水太多,注意避免失水,在37度不要放置太长时间,胶凝后可用保鲜膜包裹后保存于4度。
4. 6M=6mol/L,用于蛋白变性。
5楼2009-11-05 09:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +4 yexuqing 2026-04-19 4/200 2026-04-20 14:47 by brantleo
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +15 河南农业大学-能 2026-04-14 15/750 2026-04-20 12:39 by Equinoxhua
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 5/250 2026-04-20 10:47 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 通信工程求调剂!!! +7 zlb770521 2026-04-14 7/350 2026-04-19 20:56 by Equinoxhua
[考研] 297,工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 291求调剂 +12 关忆北. 2026-04-14 13/650 2026-04-19 16:50 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
信息提示
请填处理意见