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汕头大学海洋科学接受调剂
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yoyoyehan

[交流] 双酶切的反应体系和时间

各位虫友有做过XbaI和XhoI双酶切的么?
我用这两个酶切  反应体系  XbaI  1ul,
                                          XhoI   1ul,
                                        10  M   2ul,
                                           质粒  5ul,
                                       ddH2O  11ul
                           37度  6小时,但是酶切后效果不好,请问大家的反应体系和反应条件是怎么样的呀?
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宛辰

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们用的是takala的,但是我们只酶切3个小时,没切过那么久,你可以试试把时间减少点,再有就是你的质粒不要太多,要是质粒很浓的话,加那么多,体系还小,容易切得效果不好!
8楼2009-11-04 15:21:56
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是TaKaRa的酶,将酶切体系扩大一倍试试。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-11-04 09:41:29
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xiaoai8039

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
关键问题是:你的质粒浓度是不是太高或太低了???
检测一下浓度是多大,从而来确定酶的用量,一般酶的用量要稍大些。
3楼2009-11-04 10:22:19
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小小豆豆

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先检测一下质粒浓度,在确定酶得用量
4楼2009-11-04 10:27:31
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