24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5551  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yoyoyehan

[交流] 双酶切的反应体系和时间

各位虫友有做过XbaI和XhoI双酶切的么?
我用这两个酶切  反应体系  XbaI  1ul,
                                          XhoI   1ul,
                                        10  M   2ul,
                                           质粒  5ul,
                                       ddH2O  11ul
                           37度  6小时,但是酶切后效果不好,请问大家的反应体系和反应条件是怎么样的呀?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

银杏下

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
得看你是哪个公司的酶,比如NEB的是可以同时酶切,而fermentas的是不可以的。另外你这个体系我认为是酶加多了,一般XhoI 50uL体系加1uL就可以了,你20uL就加了1uL,根据我的经验,酶加多了反而是切割不能完全。
6楼2009-11-04 14:33:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是TaKaRa的酶,将酶切体系扩大一倍试试。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-11-04 09:41:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoai8039

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
关键问题是:你的质粒浓度是不是太高或太低了???
检测一下浓度是多大,从而来确定酶的用量,一般酶的用量要稍大些。
3楼2009-11-04 10:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小豆豆

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先检测一下质粒浓度,在确定酶得用量
4楼2009-11-04 10:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 320求调剂 +4 深郊akm 2026-04-17 4/200 2026-04-17 17:32 by 一切OK
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +4 qut2026 2026-04-11 8/400 2026-04-17 16:10 by 会飞的猪157
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +6 小蜗牛* 2026-04-16 6/300 2026-04-17 10:05 by 涵竹刘
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 22专硕求调剂 +10 haoyun上岸 2026-04-11 12/600 2026-04-16 22:21 by 猪会飞
[考研] 294求调剂 +14 淡然654321 2026-04-15 14/700 2026-04-16 21:01 by lpl364211
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+7 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 29/1450 2026-04-16 09:00 by screening
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
信息提示
请填处理意见