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yoyoyehan

[交流] 关于pET抗性筛选问题

最近在构建载体,pET和目的片段双酶切后连接,转入DH5α,涂培养基,就是不长菌落,做了好几次,都不长,
  我的培养基里加的Amp,难道是这里出问题了?pET是抗KaNa的,我是不该加KaNa?请虫友们指教,
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你用载体连图谱都没有看过?
pET有的是氨苄抗性有的是卡那抗性

我觉得首要问题是你要搞清楚你用的是哪个载体?你不看看图谱怎么做后续实验呢
9楼2009-11-04 13:14:06
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wmjiang

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
当然加Km啊,这是常识。你是学生物的吗?
2楼2009-11-03 18:39:11
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konggy

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要看是PET的哪种载体,有kana抗性,也有Amp抗性的
3楼2009-11-03 19:02:07
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
因为PET载体是抗Kana的,当然应该加Kana,加Amp菌但让不会长了,都被杀死了
4楼2009-11-03 19:46:31
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