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Annexin V-AbFluor 647 细胞凋亡检测试剂盒
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Annexin V-AbFluor 647 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V - AbFluor 647 细胞凋亡检测试剂盒是一种用于检测细胞凋亡的工具，以下是其详细介绍： 检测原理 在正常细胞中，负性磷脂位于细胞膜的内侧，而膜的外表面则被不带电的磷脂（PS）所占据。当细胞进入凋亡状态后，带负电的 PS 从质膜的内叶向外叶运输，使 PS 暴露在细胞外环境中。人抗凝血剂 Annexin V 是一种 35 - 36kDa 的 Ca²⁺依赖性磷脂结合蛋白，对 PS 具有高度亲和力。Annexin V 标记有荧光团 AbFluor™ 647，可通过与外叶 PS 结合识别凋亡细胞。碘化丙啶（PI）是一种荧光核染料，对活细胞和凋亡细胞不敏感，但可对死细胞进行红色荧光染色，与细胞内的核酸结合紧密。在试剂盒提供的结合缓冲液中用 Annexin V - AbFluor™ 647 和 PI 染色细胞群后，早期凋亡细胞显示细胞膜暗红色荧光，死细胞显示细胞核红色荧光和细胞膜暗红色荧光，活细胞几乎没有荧光。检测可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行分析。 试剂盒组成 通常包含 Annexin V - AbFluor™ 647、PI、Annexin V 结合缓冲液（通常有 5× 浓缩液，使用时需稀释成 1×）等试剂，还可能包括一些用于细胞洗涤的缓冲液等。 产品特点 荧光特性优良：AbFluor™ 647 荧光染料具有良好的亮度和光稳定性，其吸收光谱与普通激发光源的主要输出波长相匹配，在较广泛的 pH 范围内保持强荧光，且有良好的水溶性，储存不易产生沉淀。 操作简便：操作时间短，染色后不需要清洗离心步骤（流式细胞仪分析时），节省时间。 检测方法多样：可通过流式细胞仪进行定量分析，也可通过荧光显微镜进行定性观察，适用于不同实验需求。 区分不同细胞状态：能同时区分活细胞、早期凋亡细胞和死细胞，为研究细胞凋亡过程提供更全面的信息。 使用方法 流式细胞仪分析：先诱导细胞凋亡并设置对照培养物，然后收集细胞，用冰预冷的 PBS 洗涤，再用 1×Annexin V 结合缓冲液重悬细胞，加入 Annexin V - AbFluor™ 647 和 PI 后室温避光孵育，孵育结束后加入缓冲液并在染色后 30 分钟内通过流式细胞仪分析，使用 650nm 和 535nm 激发，665nm 和 617nm 附近测量荧光。 荧光显微镜分析：悬浮细胞的操作与流式细胞仪分析的前几步类似，最后将细胞悬浮置于玻片上用盖玻片盖住，通过荧光显微镜分析；贴壁细胞则需先接种于爬片或腔室载玻片上培养并诱导凋亡，除去培养基并用 PBS 洗涤后，加入含 Annexin V - AbFluor™ 647 和 PI 的工作液孵育，再用 1×Annexin V 结合缓冲液洗涤，最后添加缓冲液或用抗荧光淬灭封片剂封片后在荧光显微镜下分析。 应用领域 主要用于细胞凋亡相关的基础研究和药物研发等领域，如研究细胞凋亡的机制、评估药物对细胞凋亡的诱导作用、筛选具有抗凋亡或促凋亡活性的化合物等。 技术支持 亚科因（武汉）生物技术有限公司 Abbkine亚科因致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键生化检测试剂盒的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。 |
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