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【求助】色谱柱清洗求助
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前两天测雄果酸样品,流动相为甲醇:0.2%乙酸铵(85:15),流速1ml/min,柱压最大30MPa。 熊果酸标品以甲醇做溶剂,样品提取试剂也是甲醇。 开始用流动相平衡的时候,柱压为15MPa左右。因为是新柱子,新仪器,平衡的时间长一点,平衡及跑标样过程中,柱压逐渐升高到18MPa,最后一次做样品时,柱压升高到20MPa。 清洗柱子的时候,考虑到流动相中盐浓度较高,可能会有乙酸铵晶体堵塞柱子。开始一直用纯水冲洗,但柱压高,0.5ml/min时,柱压能升到22MPa以上,用甲醇:水(85:15),0.5ml/min冲洗时,柱压反而能降到17MPa左右,后来改用纯甲醇或纯水冲洗,流速不变,柱压都在20MPa以上.流速升高到1ml/min柱压就会超过30MPa。 今天尝试以甲醇:乙腈(80:20),流速1ml/min冲洗,柱压很快降到13MPa,并维持稳定,后来换成纯甲醇,柱压保持在15-16MPa。但换成纯水冲洗,0.5ml/min时,柱压还是在22MPa以上,流速1ml/min时柱压又会超过30MPa。 实在是不得其解,请高手指点该如何将柱子冲洗干净。 忘了说了,柱子是rainbow C18反相柱4.6*250 mm。 |
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