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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 无机/物化 » 实验技术 » 【求助】色谱柱清洗求助
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zhangkii

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助】色谱柱清洗求助

前两天测雄果酸样品，流动相为甲醇：0.2%乙酸铵（85：15），流速1ml/min，柱压最大30MPa。

熊果酸标品以甲醇做溶剂，样品提取试剂也是甲醇。

开始用流动相平衡的时候，柱压为15MPa左右。因为是新柱子，新仪器，平衡的时间长一点，平衡及跑标样过程中，柱压逐渐升高到18MPa，最后一次做样品时，柱压升高到20MPa。

清洗柱子的时候，考虑到流动相中盐浓度较高，可能会有乙酸铵晶体堵塞柱子。开始一直用纯水冲洗，但柱压高，0.5ml/min时，柱压能升到22MPa以上，用甲醇：水（85：15），0.5ml/min冲洗时，柱压反而能降到17MPa左右，后来改用纯甲醇或纯水冲洗，流速不变，柱压都在20MPa以上.流速升高到1ml/min柱压就会超过30MPa。

今天尝试以甲醇：乙腈（80：20），流速1ml/min冲洗，柱压很快降到13MPa，并维持稳定，后来换成纯甲醇，柱压保持在15-16MPa。但换成纯水冲洗，0.5ml/min时，柱压还是在22MPa以上，流速1ml/min时柱压又会超过30MPa。

实在是不得其解，请高手指点该如何将柱子冲洗干净。

忘了说了，柱子是rainbow C18反相柱4.6*250 mm。
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1楼 2009-10-30 16:02:23
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longwave

木虫之王 (文学泰斗)
★ ★
小木虫(金币+0.5):恭喜抢沙发，给个红包
chemistryer(金币+1,VIP+0):鼓励交流 10-30 20:06
是不是水有问题哪
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我什么都不说,路过看看!
2楼2009-10-30 18:28:52
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zhangkii

新虫 (正式写手)
水应该没有问题
我以前做色谱，一直是哇哈哈纯净水+45um过滤
这次也一样
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3楼2009-10-30 21:53:35
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suzhigang

银虫 (初入文坛)
★
heavence007(金币+1,VIP+0):谢谢应助 11-8 23:56
柱子是不是堵了。
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4楼2009-11-08 22:22:02
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2510458967

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zeng1986kai(金币+1,VIP+0):谢谢应助！ 11-10 08:34
C18反相柱不能用纯水冲洗，会使健合相弯曲的。如果要冲去盐，要用70-80％的甲醇水溶液冲洗
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5楼2009-11-09 22:13:11
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ssfei116

铁杆木虫 (著名写手)

快乐家族--Happy更进
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zeng1986kai(金币+2,VIP+0):谢谢应助！ 11-10 08:34
建议不要用纯水洗，如果流动相有盐的话，你可以配置一定比例的甲醇：水，如50：50、40：60等冲洗柱子，冲洗一段时间后再换纯水或直接用甲醇冲洗一般即可
赞一下(11人) 回复此楼
想到了去trytry......
6楼2009-11-10 08:24:19
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