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【求助】色谱柱清洗求助
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前两天测雄果酸样品，流动相为甲醇：0.2%乙酸铵（85：15），流速1ml/min，柱压最大30MPa。 熊果酸标品以甲醇做溶剂，样品提取试剂也是甲醇。 开始用流动相平衡的时候，柱压为15MPa左右。因为是新柱子，新仪器，平衡的时间长一点，平衡及跑标样过程中，柱压逐渐升高到18MPa，最后一次做样品时，柱压升高到20MPa。 清洗柱子的时候，考虑到流动相中盐浓度较高，可能会有乙酸铵晶体堵塞柱子。开始一直用纯水冲洗，但柱压高，0.5ml/min时，柱压能升到22MPa以上，用甲醇：水（85：15），0.5ml/min冲洗时，柱压反而能降到17MPa左右，后来改用纯甲醇或纯水冲洗，流速不变，柱压都在20MPa以上.流速升高到1ml/min柱压就会超过30MPa。 今天尝试以甲醇：乙腈（80：20），流速1ml/min冲洗，柱压很快降到13MPa，并维持稳定，后来换成纯甲醇，柱压保持在15-16MPa。但换成纯水冲洗，0.5ml/min时，柱压还是在22MPa以上，流速1ml/min时柱压又会超过30MPa。 实在是不得其解，请高手指点该如何将柱子冲洗干净。 忘了说了，柱子是rainbow C18反相柱4.6*250 mm。 |
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