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镍柱蛋白纯化求助
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我是用BL21表达了植物中的一个蛋白，过完镍柱后有一些杂蛋白，目前有个问题是我过夜孵育后用10、20mM咪唑去洗，很容易把目的蛋白洗下来，导致后面洗脱的时候目的蛋白几乎没有了，想请教一下各位大佬，有什么方法可以避免目的蛋白被大量洗涤下来。 发自小木虫手机客户端 |
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前面的咪唑浓度可以再低一点，可以拉线性梯度确定那个浓度不会洗脱下来，哪个会把你的目标蛋白一下来，梯度区间小才能更纯，另外考虑变换不同的pH和离子强度，不要只考虑单因素 发自小木虫手机客户端 |
2楼2024-12-11 15:46:26
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