| 查看: 887 | 回复: 0 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者过期的匹萨将赠送您 5 个金币 | ||
[求助]
求助一个构建CHO稳转细胞系的问题
|
||
| 用的CHO-S细胞系，使用piggybac转座子想要导入一个目的基因构建稳转细胞系，按照文章中的方法进行实验，两种质粒质量比donor : helper=9 : 1，转染使用了PEI和脂质体的化转法，48h后更换培养基为含有10 μg/mL嘌呤霉素的培养基筛选。目前问题是筛选过程中前两天细胞还算正常，第三天或者第四天时细胞会出现大批量死亡，基本最后就没有幸存的了。另外这个质粒上有带GFP，转染完成后观察GFP荧光强度还是比较好的，随着筛选逐渐绿色的细胞越来越少了，求助一下怎么办，哪里可能出了问题，转染阳性率太低。 |
回复此楼» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有115人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复