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准博士金虫 (正式写手)
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[交流]
简并引物设计失败,找原因中
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上周根据同属菌种的同一酶基因的保守序列,设计了简并引物,正向反向均为6个氨基酸,文献中也是这么设计就克隆了目的片段,而我用同样的方法,克隆的目的片段却不行,理论上应当是670bp左右,而我只克隆出来524bp,在NCBI中blast,跟另一个酶相似性挺高,却不是我的那个酶。其实当时PCR出来的结果,我就觉得有些不对劲。 唉,这简并引物到底怎么弄啊?真的这么难吗?有谁可以帮帮我啊? |
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5楼2009-11-02 11:28:04
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
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laojiu9878
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4楼2009-11-02 08:57:55














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