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准博士金虫 (正式写手)
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简并引物设计失败，找原因中
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上周根据同属菌种的同一酶基因的保守序列，设计了简并引物，正向反向均为6个氨基酸，文献中也是这么设计就克隆了目的片段，而我用同样的方法，克隆的目的片段却不行，理论上应当是670bp左右，而我只克隆出来524bp，在NCBI中blast，跟另一个酶相似性挺高，却不是我的那个酶。其实当时PCR出来的结果，我就觉得有些不对劲。 唉，这简并引物到底怎么弄啊？真的这么难吗？有谁可以帮帮我啊？ |
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