| 查看: 1293 | 回复: 3 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者秦风拂面将赠送您 20 个金币 | ||
[求助]
枯草芽孢杆菌异源表达胰蛋白酶酶活问题已有1人参与
|
||
|
大家好，想向大家请教一个问题。 鄙人的问题是这样的： 我以枯草芽孢杆菌专用的质粒pwb980为载体，构建了用以表达链霉菌胰蛋白酶的重组质粒，并将其转化至枯草芽孢杆菌SCK6中，后续的转化子测序鉴定结果显示我的重组质粒转化成功。紧接着我将该重组菌株扩培发酵产酶并测定酶活，结果显示有酶活。但是我第二次接种相同的甘油管菌株发酵产酶，但是却无酶活。不知道问题出在哪里。 我细细观察了一下，发酵产酶时的培养液是偏白的，发酵不产酶时的培养液是偏黄绿色的，不知道为什么会有这种差异情况出现，按理说接种的是同一支甘油管菌里的原始菌株，且培养基配方是相同的。 后续我也使用载体的通用引物进行了PCR鉴定，结果显示我的目的条带存在，质粒也未丢失。同时我也重新进行了质粒的重组转化，测序结果也正确，但是发酵产酶也依旧无酶活。但是我第一次转化时的确显示重组菌株产酶，且具有较高的酶活。 希望大佬们能指点一下迷津，鄙人感激不尽，金币也奉上。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有268人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
ap372767129
铁虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 320.3
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 370
- 在线: 35小时
- 虫号: 3688210
- 注册: 2015-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2024-11-18 18:36:24
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 192.8
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2024-12-05 11:23:33
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 192.8
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2025-01-04 17:32:05