| 查看: 1787 | 回复: 3 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者秦风拂面将赠送您 20 个金币 | ||
[求助]
枯草芽孢杆菌异源表达胰蛋白酶酶活问题 已有1人参与
|
||
|
大家好，想向大家请教一个问题。 鄙人的问题是这样的： 我以枯草芽孢杆菌专用的质粒pwb980为载体，构建了用以表达链霉菌胰蛋白酶的重组质粒，并将其转化至枯草芽孢杆菌SCK6中，后续的转化子测序鉴定结果显示我的重组质粒转化成功。紧接着我将该重组菌株扩培发酵产酶并测定酶活，结果显示有酶活。但是我第二次接种相同的甘油管菌株发酵产酶，但是却无酶活。不知道问题出在哪里。 我细细观察了一下，发酵产酶时的培养液是偏白的，发酵不产酶时的培养液是偏黄绿色的，不知道为什么会有这种差异情况出现，按理说接种的是同一支甘油管菌里的原始菌株，且培养基配方是相同的。 后续我也使用载体的通用引物进行了PCR鉴定，结果显示我的目的条带存在，质粒也未丢失。同时我也重新进行了质粒的重组转化，测序结果也正确，但是发酵产酶也依旧无酶活。但是我第一次转化时的确显示重组菌株产酶，且具有较高的酶活。 希望大佬们能指点一下迷津，鄙人感激不尽，金币也奉上。 |
回复此楼» 猜你喜欢
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有132人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
ap372767129
铁虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 320.3
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 370
- 在线: 35小时
- 虫号: 3688210
- 注册: 2015-02-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2024-11-18 18:36:24
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 194.3
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2024-12-05 11:23:33
wangqi1107
银虫 (小有名气)
- 应助: 57 (初中生)
- 金币: 194.3
- 红花: 2
- 帖子: 122
- 在线: 121.7小时
- 虫号: 995882
- 注册: 2010-04-13
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2025-01-04 17:32:05