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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 还是双酶切的问题
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yoyoyehan

[交流] 还是双酶切的问题

做原核表达，利用含有酶切位点的引物已经扩增出目的条带，但是双酶切后电泳怎么没有条带呢？酶切 37度，6小时，请大家帮忙分析分析怎么回事？
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1楼 2009-10-28 17:50:53
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yjhorn

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
确定引物扩增出目的片段？
电永的目的片段量够？
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认识大家是缘分啊！
4楼2009-10-28 19:13:51
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message

铁虫 (初入文坛)
★
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会不会是酶切时间太长弥散了，一般我都切3小时，还是你上样量太小。
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2楼2009-10-28 18:30:16
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
6小时是不是太长了点啊，我一般切45min，用的是NEB的酶
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-28 18:47:30
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yuanfeng

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是时间太长了吧，出现星号活性，或者被切散了
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5楼2009-10-28 19:43:09
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