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yoyoyehan

[交流] 还是双酶切的问题

做原核表达,利用含有酶切位点的引物已经扩增出目的条带,但是双酶切后电泳怎么没有条带呢?酶切 37度,6小时,请大家帮忙分析分析怎么回事?
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gyesang

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
6小时是不是太长了点啊,我一般切45min,用的是NEB的酶
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-28 18:47:30
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message

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
会不会是酶切时间太长弥散了,一般我都切3小时,还是你上样量太小。
2楼2009-10-28 18:30:16
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yjhorn

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
确定引物扩增出目的片段?
电永的目的片段量够?
认识大家是缘分啊!
4楼2009-10-28 19:13:51
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yuanfeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是时间太长了吧,出现星号活性,或者被切散了
5楼2009-10-28 19:43:09
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