24小时热门版块排行榜    

查看: 747  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shell_ya

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助;双酶切切不出来

我用BamH1和Xhol1对质粒进行双酶切,用10微升体系切不到条带,加大为100微升体系的时候切到三条带。理应至切到两条带的,且三条带中也没有我要的目的条带。请教各位帮忙指导一下,谢谢!

[ Last edited by amisking on 2009-10-26 at 22:12 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by shell_ya at 2009-10-26 21:53:
我用BamH1和Xhol1对质粒进行双酶切,用10微升体系切不到条带,加大为100微升体系的时候切到三条带。理应至切到两条带的,且三条带中也没有我要的目的条带。请教各位帮忙指导一下,谢谢!

[ Last edited by am ...

先好好分析下质粒的图谱,看看这两个酶切位点到底有多少个。其实验证的话10ul的体系也就够了。如果你的质粒正确的话你可能少分析到了一个酶切位点。
5楼2009-10-27 00:07:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)

有图吗?什么质粒?
2楼2009-10-26 22:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lywinan

捐助贵宾 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-27 08:18
1、个人感觉10微升的体系较小,酶的用量不要超过总体积的十分之一;而100微升的体系较大,如果切胶回收,我一般使用20微升的体系,可以切两个相同的体系,而后回收时过一个柱子;
2、设计双酶切时,要看目的片断中不要有酶切位点;
3、酶切前对质粒的质量进行控制,可以跑个质粒样品或在其他位点进行酶切验证,看是否是目的质粒
就想到这些
3楼2009-10-26 22:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘一笑

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
切的时间控制,双酶切不行就先后单切,你的酶切图谱一定仔细看分析一下,
真实的活着,真实的追求,真实的享受,每一天的存在感
4楼2009-10-26 23:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料292调剂 +3 橘颂思美人 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:36 by pswait
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +7 生物工程调剂 2026-03-17 12/600 2026-03-23 18:18 by YMU施老师
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +3 WW.' 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:18 by 枫翼ljj
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 085600材料与化工 +10 安全上岸! 2026-03-16 10/500 2026-03-23 09:31 by Jy?
[考研] 284求调剂 +6 Zhao anqi 2026-03-22 6/300 2026-03-23 09:23 by king123!
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 环境学硕288求调剂 +6 皮皮皮123456 2026-03-22 6/300 2026-03-22 16:52 by i_cooler
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
信息提示
请填处理意见