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a85202金虫 (小有名气)
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菌落PCR验证问题 已有1人参与
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各位虫友好,最近菌落PCR验证遇到了奇怪的问题: 我在铜绿假单胞菌中电转pherd20T质粒,直接从转化板上挑选单菌落,是可以验证出质粒的条带的,很清晰,这为第一次验证。 为了进一步验证,我将第一次验证对的单菌落,再次通过加有抗生素的摇菌管进行扩大,之后再取菌液作为模板对电转的质粒进行PCR验证,发现没有扩出质粒中对应的条带,阴性对照和阳性对照没有问题。 按理说,如果第一次是假阳性,那么扩大培养应该不长,现在是PCR验证不出质粒条带,但是菌株又能够在抗生素的培养基中正常生长,这是什么情况? 不知道大家有没有遇到类似的问题。 其他质粒也出现过这种情况,很是费解。 |
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a85202
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