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a85202金虫 (小有名气)
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[交流]
菌落PCR验证问题已有1人参与
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各位虫友好，最近菌落PCR验证遇到了奇怪的问题： 我在铜绿假单胞菌中电转pherd20T质粒，直接从转化板上挑选单菌落，是可以验证出质粒的条带的，很清晰，这为第一次验证。 为了进一步验证，我将第一次验证对的单菌落，再次通过加有抗生素的摇菌管进行扩大，之后再取菌液作为模板对电转的质粒进行PCR验证，发现没有扩出质粒中对应的条带，阴性对照和阳性对照没有问题。 按理说，如果第一次是假阳性，那么扩大培养应该不长，现在是PCR验证不出质粒条带，但是菌株又能够在抗生素的培养基中正常生长，这是什么情况？ 不知道大家有没有遇到类似的问题。 其他质粒也出现过这种情况，很是费解。 |
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