24小时热门版块排行榜    

查看: 4277  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ZZhepta

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助大神!大肠杆菌高密度发酵问题。 已有5人参与

希望做这方面的大佬帮我分析下大肠杆菌高密度发酵的问题。十分感谢!

我遇到的主要问题是,发酵6-12h时间,取样的菌体越来越容易沉降,发酵液味道越来越酸,且OD值后面就停滞不长了,发酵液色泽逐渐变成褐色,补料后的葡萄糖会被消耗,但是菌体浓度也不会长,好多个失败的罐子OD值只到了20左右,我查了下资料,说是乙酸抑制了,还请大佬帮我分析分析,做了50个罐子了,成功了3个,呜呜呜。

1.  配方是无机盐类型,起始葡萄糖浓度是20g/L,我想问下,中途条件合适的情况下,糖耗完,OD值能长到多少?
2.  发酵前期比生长速率怎么控制合适,每个小时的OD怎么变化呀?
3.   我给的起始条件是通气1:2,转速400,中途升转速至500,然后葡萄糖耗完时OD值为13左右,开始恒速流加补葡萄糖,2.5g/L/h。然后补着补着菌就不对了。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
基础培养阶段也不用刻意控制比生长速率,只要保证该阶段营养消耗完,溶氧出现反弹再进行补料,你的初始发酵工艺都有点不合适,初始阶段转速太高,溶氧太高,会导致后期提高转速溶氧都上不去的情况,菌体生长受限,就会出现你这些情况
3楼2024-07-24 16:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很明显发酵工艺是有问题的,一般发酵初始阶段,通气量0.5-1VVM,转速100rpm就行了,设置溶氧联动自动调节,调到500-600rpm就可以关掉联动,等溶氧反弹后,再开始补料,像你说的这些问题,味道发酸,培养液基本上都是补进去的料液的颜色,菌体根本就没消耗,都是菌体开始衰老死亡了,补料速率快了或者糖浓度高了一些,可以考虑改变补料方式,或者降低补料浓度,一般可以联动补料或者指数补料,

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2024-07-24 16:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

后来就算

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、发酵6-12h,20g/l的初糖耗完,OD值能长到20以上。这个与你的培养基有关。
2、发酵前期营养不是限制因素,一般通过温度、pH控制、供养来控制生长,如前期200rpm,30%-40%的溶氧。
3、菌是工程菌么?是否已经排除杂菌等外围的影响?
什么时候积分不是零啊
5楼2024-07-25 15:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
除了楼上几位说的外,还有就是注意C/N比,比例不对也容易导致菌株不长,最后就是下罐的时候留意一下离心后的菌株状态,如果有大量的鼻涕状的粘稠物质,就说明菌株已经开始大量死亡了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2024-07-29 14:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 接收调剂 +15 津萌津萌 2026-03-02 23/1150 2026-03-03 23:39 by 梦—-
[考研] 291求调剂 +4 Afy123456 2026-03-03 7/350 2026-03-03 22:29 by barlinike
[考博] 26申博 求博导 +3 爱读书的小帅 2026-02-28 5/250 2026-03-03 22:17 by 远方13579
[考研] 理学,工学,农学调剂,少走弯路,这里欢迎您! +8 likeihood 2026-03-02 11/550 2026-03-03 19:39 by 一叶凡尘?
[考研] 266材料化工求调剂 +3 哇塞王帅 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:58 by houyaoxu
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +4 更多的是 2026-02-27 5/250 2026-03-03 17:44 by wenium
[基金申请] 没有青基直接申请面上,感觉自己疯了 +5 kevin63t 2026-03-02 6/300 2026-03-03 17:15 by taoyijie
[考研] 化工270求调剂 +10 什么名字qwq 2026-03-02 10/500 2026-03-03 13:54 by NUAAZXWS
[考研] 278求调剂 +3 满天星11_22 2026-03-02 3/150 2026-03-03 13:51 by Iveryant
[考研] 299求调剂 +5 kkcoco25 2026-03-02 9/450 2026-03-03 12:55 by 公瑾逍遥
[考研] 材料工程求调剂 +3 1431251 2026-03-03 3/150 2026-03-03 11:58 by EBSD
[考博] 26申博 +4 north, 2026-02-28 4/200 2026-03-03 10:12 by LOYUBUAA
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 275求调剂 +7 明远求学 2026-03-01 7/350 2026-03-02 19:22 by zhukairuo
[考研] 289求调剂 +8 yang婷 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:08 by zhukairuo
[考研] 一志愿山东大学材料与化工325求调剂 +5 半截的诗0927 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:37 by 明亮9527
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
请填处理意见