24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4569  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ZZhepta

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助大神!大肠杆菌高密度发酵问题。 已有5人参与

希望做这方面的大佬帮我分析下大肠杆菌高密度发酵的问题。十分感谢!

我遇到的主要问题是,发酵6-12h时间,取样的菌体越来越容易沉降,发酵液味道越来越酸,且OD值后面就停滞不长了,发酵液色泽逐渐变成褐色,补料后的葡萄糖会被消耗,但是菌体浓度也不会长,好多个失败的罐子OD值只到了20左右,我查了下资料,说是乙酸抑制了,还请大佬帮我分析分析,做了50个罐子了,成功了3个,呜呜呜。

1.  配方是无机盐类型,起始葡萄糖浓度是20g/L,我想问下,中途条件合适的情况下,糖耗完,OD值能长到多少?
2.  发酵前期比生长速率怎么控制合适,每个小时的OD怎么变化呀?
3.   我给的起始条件是通气1:2,转速400,中途升转速至500,然后葡萄糖耗完时OD值为13左右,开始恒速流加补葡萄糖,2.5g/L/h。然后补着补着菌就不对了。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
基础培养阶段也不用刻意控制比生长速率,只要保证该阶段营养消耗完,溶氧出现反弹再进行补料,你的初始发酵工艺都有点不合适,初始阶段转速太高,溶氧太高,会导致后期提高转速溶氧都上不去的情况,菌体生长受限,就会出现你这些情况
3楼2024-07-24 16:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很明显发酵工艺是有问题的,一般发酵初始阶段,通气量0.5-1VVM,转速100rpm就行了,设置溶氧联动自动调节,调到500-600rpm就可以关掉联动,等溶氧反弹后,再开始补料,像你说的这些问题,味道发酸,培养液基本上都是补进去的料液的颜色,菌体根本就没消耗,都是菌体开始衰老死亡了,补料速率快了或者糖浓度高了一些,可以考虑改变补料方式,或者降低补料浓度,一般可以联动补料或者指数补料,

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2024-07-24 16:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

后来就算

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、发酵6-12h,20g/l的初糖耗完,OD值能长到20以上。这个与你的培养基有关。
2、发酵前期营养不是限制因素,一般通过温度、pH控制、供养来控制生长,如前期200rpm,30%-40%的溶氧。
3、菌是工程菌么?是否已经排除杂菌等外围的影响?
什么时候积分不是零啊
5楼2024-07-25 15:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
除了楼上几位说的外,还有就是注意C/N比,比例不对也容易导致菌株不长,最后就是下罐的时候留意一下离心后的菌株状态,如果有大量的鼻涕状的粘稠物质,就说明菌株已经开始大量死亡了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2024-07-29 14:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 接受任何调剂 +4 也就是栗子 2026-04-17 4/200 2026-04-17 17:57 by Equinoxhua
[考研] 279求调剂 +13 张番茄不炒蛋 2026-04-11 13/650 2026-04-17 10:38 by cuisz
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 求调剂 +11 小聂爱学习 2026-04-11 15/750 2026-04-15 21:57 by noqvsozv
[考研] 297,工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +43 xaw. 2026-04-11 44/2200 2026-04-15 12:46 by 西北望—风沙
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 求调剂,985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
信息提示
请填处理意见