应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 求助大神！大肠杆菌高密度发酵问题。
51/1返回列表
查看: 4288  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ZZhepta

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助大神！大肠杆菌高密度发酵问题。 已有5人参与

希望做这方面的大佬帮我分析下大肠杆菌高密度发酵的问题。十分感谢！

我遇到的主要问题是，发酵6-12h时间，取样的菌体越来越容易沉降，发酵液味道越来越酸，且OD值后面就停滞不长了，发酵液色泽逐渐变成褐色，补料后的葡萄糖会被消耗，但是菌体浓度也不会长，好多个失败的罐子OD值只到了20左右，我查了下资料，说是乙酸抑制了，还请大佬帮我分析分析，做了50个罐子了，成功了3个，呜呜呜。

1.  配方是无机盐类型，起始葡萄糖浓度是20g/L，我想问下，中途条件合适的情况下，糖耗完，OD值能长到多少？
2.  发酵前期比生长速率怎么控制合适，每个小时的OD怎么变化呀？
3.   我给的起始条件是通气1：2，转速400，中途升转速至500，然后葡萄糖耗完时OD值为13左右，开始恒速流加补葡萄糖，2.5g/L/h。然后补着补着菌就不对了。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2024-07-24 10:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
基础培养阶段也不用刻意控制比生长速率，只要保证该阶段营养消耗完，溶氧出现反弹再进行补料，你的初始发酵工艺都有点不合适，初始阶段转速太高，溶氧太高，会导致后期提高转速溶氧都上不去的情况，菌体生长受限，就会出现你这些情况
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2024-07-24 16:49:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lishuangls92

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很明显发酵工艺是有问题的，一般发酵初始阶段，通气量0.5-1VVM，转速100rpm就行了，设置溶氧联动自动调节，调到500-600rpm就可以关掉联动，等溶氧反弹后，再开始补料，像你说的这些问题，味道发酸，培养液基本上都是补进去的料液的颜色，菌体根本就没消耗，都是菌体开始衰老死亡了，补料速率快了或者糖浓度高了一些，可以考虑改变补料方式，或者降低补料浓度，一般可以联动补料或者指数补料，
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ZZhepta
2楼2024-07-24 16:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

后来就算

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、发酵6-12h，20g/l的初糖耗完，OD值能长到20以上。这个与你的培养基有关。
2、发酵前期营养不是限制因素，一般通过温度、pH控制、供养来控制生长，如前期200rpm，30%-40%的溶氧。
3、菌是工程菌么？是否已经排除杂菌等外围的影响？
赞一下 回复此楼
什么时候积分不是零啊
5楼2024-07-25 15:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除了楼上几位说的外，还有就是注意C/N比，比例不对也容易导致菌株不长，最后就是下罐的时候留意一下离心后的菌株状态，如果有大量的鼻涕状的粘稠物质，就说明菌株已经开始大量死亡了
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ZZhepta
6楼2024-07-29 14:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎211本科同学，过A区国家线，A区非偏远一本，交叉学科课题组 +8 lisimayy 2026-03-04 12/600 2026-03-05 01:59 by florence45
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +13 xhuama 2026-03-02 14/700 2026-03-05 00:04 by 雪霓裳
[考研] 0703 东华大学 理学化学均过 a 线，总分 281 求调剂 +3 香香 Lu 2026-03-03 6/300 2026-03-04 22:05 by 香香 Lu
[考研] 材料085600 303求调剂 +6 1bygone 2026-03-04 6/300 2026-03-04 21:18 by wutongshun
[考研] 材料复试调剂 +7 学材料的点 2026-03-01 8/400 2026-03-04 21:08 by wutongshun
[考研] 一志愿西交化工专硕288专业课93求调剂 +5 好运好运接接 2026-03-04 5/250 2026-03-04 20:37 by kakakapanpan
[考研] 0703化学求调剂 +3 将未有期 2026-03-04 3/150 2026-03-04 16:19 by sslc1985
[考研] 本科太原理工采矿工程，求调剂 +3 onlx 2026-03-01 3/150 2026-03-04 15:57 by Stephen_ym
[论文投稿] 主编终审卡者不动 100+3 Stray2021 2026-03-03 3/150 2026-03-04 15:15 by babero
[考研] 293求调剂 +4 是乐渝哇 2026-03-03 4/200 2026-03-03 23:04 by zhukairuo
[考研] 0805总分292，求调剂 +12 幻想之殇 2026-03-01 12/600 2026-03-03 15:58 by tgxtgxtgx9
[考研] 没上岸的看过来 +3 tangxiaotian 2026-03-01 3/150 2026-03-03 12:03 by emokidd
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+8 ，！？ 2026-03-02 10/500 2026-03-03 12:01 by EBSD
[考研] 298求调剂 +10 人间唯你是清欢 2026-02-28 14/700 2026-03-02 22:49 by 人间唯你是清欢
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[基金申请] 此成果不能导入原因：元数据必填信息不完整，可 进行补充。 +4 Kittylucky 2026-03-02 5/250 2026-03-02 11:07 by jurkat.1640
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪！？！
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭