| 查看: 683 | 回复: 0 | |||
fengaiqin铜虫 (小有名气)
|
[交流]
RNA提取方法
|
|
本操作流程适用于植物、藻类组织的总RNA提取，为文库制备提供高质量的RNA 1.分装1.5mL 2%CTAB裂解液到2.0mL EP管上，加入2%β-巯基乙醇，65℃预热。 2 用液氮预冷研钵，组织样品放入加有液氮的研钵中，在液氮下把组织样品充分研磨成粉末。把样品粉末转入到装有裂解液的EP管中，（每mL裂解液可加30mg组织样品）。 3 65℃、400-1400rpm孵育15min，室温冷却。4℃、12,000×g离心5min。 4 吸取上清液至2.0mL EP管中，每mL裂解液加入200μL氯仿/异戊醇（24:1），震荡混匀。 5 4℃、12,000×g离心10min。 6 吸取上清液至2.0mL EP管中，加入等上清体积 酚/氯仿/异戊醇（25:24:1），震荡混匀。 7 4℃、12,000×g离心10min。 8 吸取上清液至新的2.0mL EP管中，加入等上清体积 氯仿/异戊醇（24:1），震荡混匀。 9 4℃、12,000×g离心10min。 10 吸取上清液至新的1.5mL离心管，注意不要吸到中间蛋白层，加入2/3上清液体积的异丙醇，轻轻颠倒混匀。 11 放入-20℃冰箱沉淀2h以上。 12 4℃、17,500×g离心20min。弃上清，加入1mL 75%乙醇，用移液器吹洗沉淀。 13 4℃、17,500×g离心3min，弃上清，短暂离心后吸去残留液体，晾干3-5min。 14 用20-200μL DEPC水或者 RNase-free水溶解沉淀。 |
回复此楼» 猜你喜欢
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有257人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复