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zjwang

木虫 (正式写手)

[交流] 酵母双杂交

在酵母双杂交系统中验证两个蛋白(X,Y)相互作用,如果AD-X和BD-Y能激活报告基因而AD-Y和BD-X不能激活报告基因,同时所有的对照都不能激活报告基因,能不能下结论这两个蛋白相互作用呢?
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


zjwang(金币+1,VIP+0): 10-28 08:53
仅仅这些证据证明不了什么吧。酵母双杂交验证后,还要在哺乳动物细胞里(如果是动物蛋白的话)做co-ip,或者GST-PULL DOWN,共定位,等一系列的实验来证明是否有相互作用。
10楼2009-10-27 23:59:12
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zjwang

木虫 (正式写手)

谢谢!你一般做的时候都做两套构建吗?
3楼2009-10-23 17:03:14
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by zjwang at 2009-10-23 17:03:
谢谢!你一般做的时候都做两套构建吗?

你说的两套构建的意思是BD和目的蛋白构建在一个载体上,AD和库基因构建在一个载体上吗?
4楼2009-10-23 18:15:12
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zjwang

木虫 (正式写手)

两套构建是说同时构建AD-X和BD-Y及AD-Y和BD-X。
5楼2009-10-23 18:34:04
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