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chenju123

银虫 (小有名气)


[交流] Bsu DNA Polymerase的功能及应用

各位虫友,有谁知道Bsu置换酶(有人说只能用于RPA技术)能不能像Bst置换酶一样,单独在体系中进行置换反应(SDA)?有没有相关经验?求文献及经验分享,感谢!
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Bst工作温度60-65°C,此时DNA处于单双链平衡的状态,有引物与探针匹配可以延伸

Bsu工作温度37°C,如何产生切口,让它进行延伸与置换?

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12楼2024-05-11 09:41:11
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chenju123

银虫 (小有名气)


送红花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by pennchem at 2024-05-11 09:41:11
Bst工作温度60-65°C,此时DNA处于单双链平衡的状态,有引物与探针匹配可以延伸

Bsu工作温度37°C,如何产生切口,让它进行延伸与置换?

您好,是这样的,可以设计多条不同位置的引物,或者引物中间引入切刻酶位点来提供3'-OH,我们做过相关验证,但是效率不高,不知道和酶活性或酶的置换能力是不是有相关联系?
14楼2024-05-14 10:56:59
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引用回帖:
14楼: Originally posted by chenju123 at 2024-05-14 10:56:59
您好,是这样的,可以设计多条不同位置的引物,或者引物中间引入切刻酶位点来提供3'-OH,我们做过相关验证,但是效率不高,不知道和酶活性或酶的置换能力是不是有相关联系?...

切口酶在37°C条件下,活性不高,如果底物浓度低,几乎看不到扩增。

为什么不用Bst,加耐热的切口酶,做NEAR反应?
15楼2024-05-14 15:30:50
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tzynew2楼
2024-05-06 18:01   回复  
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hyjcs3楼
2024-05-06 18:25   回复  
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2024-05-06 20:05   回复  
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wwjdwwjd6楼
2024-05-07 00:14   回复  
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jiaoxg7楼
2024-05-07 08:31   回复  
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2024-05-07 09:06   回复  
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gter_wang9楼
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