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chenju123

银虫 (小有名气)

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帖子: 56
在线: 29.1小时
虫号: 3239485

[交流] Bsu DNA Polymerase的功能及应用

各位虫友，有谁知道Bsu置换酶（有人说只能用于RPA技术）能不能像Bst置换酶一样，单独在体系中进行置换反应（SDA）？有没有相关经验？求文献及经验分享，感谢！

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1楼 2024-05-06 18:00:40

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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pennchem

专家顾问 (正式写手)

★
chenju123(金币+1): 谢谢参与

Bst工作温度60-65°C，此时DNA处于单双链平衡的状态，有引物与探针匹配可以延伸

Bsu工作温度37°C，如何产生切口，让它进行延伸与置换？

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chenju123

12楼2024-05-11 09:41:11

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:

14楼: Originally posted by chenju123 at 2024-05-14 10:56:59
您好，是这样的，可以设计多条不同位置的引物，或者引物中间引入切刻酶位点来提供3'-OH，我们做过相关验证，但是效率不高，不知道和酶活性或酶的置换能力是不是有相关联系？...

切口酶在37°C条件下，活性不高，如果底物浓度低，几乎看不到扩增。

为什么不用Bst，加耐热的切口酶，做NEAR反应？

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15楼2024-05-14 15:30:50

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