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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Bsu DNA Polymerase的功能及应用
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chenju123

银虫 (小有名气)

[交流] Bsu DNA Polymerase的功能及应用

各位虫友，有谁知道Bsu置换酶（有人说只能用于RPA技术）能不能像Bst置换酶一样，单独在体系中进行置换反应（SDA）？有没有相关经验？求文献及经验分享，感谢！
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1楼2024-05-06 18:00:40
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
chenju123(金币+1): 谢谢参与
Bst工作温度60-65°C，此时DNA处于单双链平衡的状态，有引物与探针匹配可以延伸

Bsu工作温度37°C，如何产生切口，让它进行延伸与置换？
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chenju123
12楼2024-05-11 09:41:11
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chenju123

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by pennchem at 2024-05-11 09:41:11
Bst工作温度60-65°C，此时DNA处于单双链平衡的状态，有引物与探针匹配可以延伸

Bsu工作温度37°C，如何产生切口，让它进行延伸与置换？

您好，是这样的，可以设计多条不同位置的引物，或者引物中间引入切刻酶位点来提供3'-OH，我们做过相关验证，但是效率不高，不知道和酶活性或酶的置换能力是不是有相关联系？
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14楼2024-05-14 10:56:59
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by chenju123 at 2024-05-14 10:56:59
您好，是这样的，可以设计多条不同位置的引物，或者引物中间引入切刻酶位点来提供3'-OH，我们做过相关验证，但是效率不高，不知道和酶活性或酶的置换能力是不是有相关联系？...

切口酶在37°C条件下，活性不高，如果底物浓度低，几乎看不到扩增。

为什么不用Bst，加耐热的切口酶，做NEAR反应？
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15楼2024-05-14 15:30:50
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tzynew2楼
2024-05-06 18:01   回复  
chenju123(金币+1): 谢谢参与
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hyjcs3楼
2024-05-06 18:25   回复  
chenju123(金币+1): 谢谢参与
嚄 发自小木虫Android客户端
xiaoqiuqiu204楼
2024-05-06 20:05   回复  
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miaojiabing5楼
2024-05-06 21:43   回复  
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wwjdwwjd6楼
2024-05-07 00:14   回复  
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jiaoxg7楼
2024-05-07 08:31   回复  
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slytjiaofei8楼
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gter_wang9楼
2024-05-07 09:14   回复  
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shenrenren10楼
2024-05-07 09:14   回复  
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XG-WUST11楼
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庚辰辛丑13楼
2024-05-11 22:20   回复  
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