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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR反应两条引物Tm值相差很多怎么办？
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
用降落PCR做出来了，79到71，循环数从25增加到35
循环数有很大影响吗？我在进一步验证

谢谢各位了！
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31楼2009-10-29 11:06:13
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陈思容

铜虫 (正式写手)
two-temperature PCR
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32楼2009-10-29 14:17:33
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gengyuehua

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以选择大的梯度来试试。
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33楼2009-10-29 14:28:47
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zsl2000001

银虫 (小有名气)
做个梯度试试吧
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34楼2009-10-29 15:20:37
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彩云朵朵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zsl2000001 at 2009-10-29 15:20:
做个梯度试试吧

是做的梯度，可是令人郁闷的是，前几天可以P出来，现在用同样的条件竟然P不出来了！
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35楼2009-10-29 21:43:02
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crab1983

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以做降落PCR 我以前做的降落PCR没个循环降低0.5度 降落PCR需要热启动
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36楼2009-10-30 17:09:01
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Entrez1110

做降落PCR就行了。
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37楼2009-10-30 17:11:57
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Entrez1110

引用回帖:
Originally posted by crab1983 at 2009-10-30 17:09:
可以做降落PCR 我以前做的降落PCR没个循环降低0.5度 降落PCR需要热启动

我做降落PCR没热启动过，就是专门针对退火温度摸不准的情况！
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38楼2009-10-30 17:13:25
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cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
touchdown程序跑一下，就怕你要费点时间，再加上一点运气了！
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路漫漫兮，吾必上下而求索！
39楼2009-10-31 12:00:10
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spiderboy

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做过TM值是36度和56度的。。。用TOUCHDOWN PCR，可以扩出来，不过有非特异性条带。。但是结果还是可以用的
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40楼2009-10-31 13:19:19
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