24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3926  |  回复: 41
当前主题已经存档。

彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jjlbest at 2009-10-19 10:34:
是按低的那个引物来进行,退火温度可以在TM值的上下5度浮动。

谢谢!要不我就这么先p一下试试!
11楼2009-10-19 10:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 彩云朵朵 at 2009-10-19 10:31:

分别是73  93----

Tm好高啊,都快变性温度了,用68试试看。
Thank-you,so-blue.
12楼2009-10-19 10:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-10-19 10:59:

Tm好高啊,都快变性温度了,用68试试看。

是做的重叠延伸PCR. 为啥是68,能说说理由吗?万分感谢!
13楼2009-10-19 11:17:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

比最低的低五度
海纳百川止于至善
14楼2009-10-19 12:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 1949stone at 2009-10-19 12:04:
比最低的低五度

额  汗   这个都没看出来  太不好意思了  谢谢哈
15楼2009-10-19 12:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
其实我觉得影响不大,每次我都不按照Tm值PCR都,一般都用55℃拉,一般都可以拉的出来,不行的话就降低一下退火温度。
16楼2009-10-19 17:08:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

彩云朵朵

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-19 17:08:
其实我觉得影响不大,每次我都不按照Tm值PCR都,一般都用55℃拉,一般都可以拉的出来,不行的话就降低一下退火温度。

啊?这么简单?我以前也做过普通的PCR,很麻烦哪!  

再说我的是一个73 一个93 , 55的话感觉很悬,我明天试试再向大家汇报吧
17楼2009-10-19 17:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tf1984

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我感觉很难P出来吧?
退火温度差太多基本出不来东西吧!做做看吧不行重新设计下引物 前后加点东西
18楼2009-10-19 18:47:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l_inhumain

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得很多时候由于引物的设计受到模板的控制,腾挪余地并不大,有些tm值相差很大,与引物设计规则差异也会很大,但大多数情况还是能够P出条带来的,不用太担心。设计的引物与规则越相符只能说明P出来的条带会好看一些,概率会大一些,但绝对不是有和无的差异。
19楼2009-10-19 22:53:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 彩云朵朵 at 2009-10-19 17:19:


啊?这么简单?我以前也做过普通的PCR,很麻烦哪!  

再说我的是一个73 一个93 , 55的话感觉很悬,我明天试试再向大家汇报吧

对啊,不要有什么心理压力嘛,我觉得很简单,很正常的。
20楼2009-10-19 23:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 彩云朵朵 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 5/250 2026-05-24 16:21 by hhx1yx9evi
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见