24小时热门版块排行榜    

查看: 738  |  回复: 10
当前主题已经存档。

extratju

木虫 (小有名气)

[交流] 求助:关于抑制蛋白水解

最近在做膜蛋白(GP5)的纯化,老板指出纯化过程中,我没有加入蛋白抑制剂,建议我使用pmsf,我是这方面的小白,想了解一下蛋白抑制的原理,和选择依据,请各位高手建议一下相关书籍和资料。

[ Last edited by amisking on 2009-10-17 at 10:02 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kitty8682

金虫 (正式写手)


extratju(金币+1):谢谢参与
学习中.....
2楼2009-10-17 08:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~


extratju(金币+1):谢谢参与
帮忙顶起,我也想知道!
平和悦衲!
3楼2009-10-17 08:53:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

paulajjh

木虫 (著名写手)


extratju(金币+1):谢谢参与
我也小白,帮忙顶起
4楼2009-10-17 11:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nn0808

银虫 (小有名气)


extratju(金币+1):谢谢参与
我也是了解得很粗浅,知道一些皮毛,比如每种蛋白酶都有特定的抑制剂.
5楼2009-10-17 13:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)


extratju(金币+1):谢谢参与
就是说你再纯化的过程中蛋白可能被水解,为了防止出现这种情况,加入蛋白酶抑制剂,其中pmsf是常用的。就像加RNase抑制剂防止RNA降解一个道理
6楼2009-10-17 16:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xj22667

银虫 (小有名气)


extratju(金币+1):谢谢参与
蛋白在破碎的过程中会降解,我们实验室在破碎之前都会加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解,利于蛋白的纯化 我们用的是罗氏公司的cocktail ,是片剂,自己拿超纯水溶解的 配好后可以连续用几个月的 效果不错的
7楼2009-10-17 19:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)


extratju(金币+1):谢谢参与
你老板的意见也不一定就对。
我是专门做纯化的,很少有蛋白会那么快降解,大部分蛋白还是很结实的,所以我纯化的时候一般也很少用蛋白抑制剂。
关键是表达完后,要尽快处理,比如,如果不马上纯化,就要尽快离心,将菌体冻起来,这样可以放很久的,几个月没问题,不用担心降解。如果马上纯化,那当然最好,纯化的好的话,大部分细菌中的蛋白酶也都纯化掉了,降解也就没那么容易了。纯化好的蛋白放四度,也可以放一段时间。
老板的意见也不一定对,国内很对老板都是小白,很多时候都是瞎指挥,你按你自己想的做就行了。如果不想和老板对着干,你加就可以了,反正钱是老板的。抑制剂一般都不便宜的。
生物资源交流QQ群:1044518333
8楼2009-10-17 20:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaminl

铁杆木虫 (知名作家)


extratju(金币+1):谢谢参与
我也小白,帮忙顶起
Nevergiveup!
9楼2009-10-25 10:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

missu

金虫 (小有名气)


extratju(金币+1):谢谢参与
PMSF是丝氨酸蛋白酶抑制剂,会抑制丝氨酸蛋白酶的活性,进而抑制其对蛋白质的降解作用。8楼说的有一定道理。楼主纯化的是膜蛋白,建议设计纯化方案时注意考虑其特殊性。
10楼2009-10-25 13:50:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 extratju 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +3 pk3725069 2026-03-19 14/700 2026-03-23 14:44 by Jack_333
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap-
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 求调剂 +6 十三加油 2026-03-21 6/300 2026-03-22 17:00 by i_cooler
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
信息提示
请填处理意见