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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助一个关于高效液相色谱的问题
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yanlingma

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助一个关于高效液相色谱的问题

请教一下HPLC高手，急~
我将等量的药物分别在乙醇和流动相（乙腈-水 30：70）中溶解，进样所得到的峰面积和峰形都不一样；在乙醇中溶解，会在溶剂峰前面出现两个不规则的峰，而在流动相中，溶剂峰前面没有峰出现，而且两种情况下主峰的峰面积相差也很大，是什么原因啊？
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1楼 2009-10-13 21:29:31
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lihuoyun666

金虫 (小有名气)
不应该用乙醇
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2楼2009-10-13 22:38:46
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lhzlhz007

金虫 (小有名气)
是不是溶剂峰呀？你打几针空白针跑跑看看什么情况。
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朋友多交流 呵呵
3楼2009-10-13 23:13:24
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杨雷琼

新虫 (初入文坛)
★ ★
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖交流！ 10-13 23:58
yanlingma(金币+1,VIP+0): 10-14 09:50
用乙醇混合时进样前面出现杂峰当然是乙醇的溶剂峰。
而前后两次峰面积不同原因很多，比如说仪器的稳定性（我遇到过这样的问题，前后两次进同一样品，面积和高都差很多，所以现在都用比值计算），建议你重复几次看看。选择方法第一看干扰，第二看灵敏度，如果甲醇的溶剂峰无干扰，而此时灵敏度很高时，依然是很好的方法。
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4楼2009-10-13 23:25:20
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
为了图好看些  要不用甲醇 要不就用流动相溶解嘛 为啥要用乙醇呢
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5楼2009-10-13 23:54:32
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zxcd88

铁杆木虫 (正式写手)
多出来的应该是乙醇的峰，色谱溶剂首选流动相，然后是甲醇，再或者乙腈（如果不会被骂浪费的话），最好别用其他的
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http://www.yaoq.net/?fromuid=219543
6楼2009-10-14 01:36:24
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yanlingma

铜虫 (初入文坛)
因为制剂中含乙醇，并且我的药在流动相中溶解情况不是很好，所以直接就用乙醇溶了，呵。我进过乙醇，不会出现那两个不规则的峰
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7楼2009-10-14 05:43:17
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cmj200412

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
yanlingma(金币+1,VIP+0): 10-16 19:47
lcyhappy(金币+2,VIP+0):谢谢 11-10 09:56
如果说之前没有出现过，而现在变成了两个峰，那么可能要看样品稳不稳定了。或者是之前的有问题呢？应该多做几次样品试试看。
有些成分在不同的溶剂里溶解性能有可能是很不一样的。但以个人的经验来看，直接用流动相来配制的样品不常见，用其它溶剂也没有什么问题。峰面积差距比较大有很多原因，比如观察一下保留时间是否一致，柱压稳不稳定，基线平不平等等
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8楼2009-10-15 21:53:36
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ddw888

金虫 (小有名气)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！ 10-17 17:12
yanlingma(金币+1,VIP+0):谢谢~ 10-18 10:48
引用回帖:
Originally posted by cmj200412 at 2009-10-15 21:53:
如果说之前没有出现过，而现在变成了两个峰，那么可能要看样品稳不稳定了。或者是之前的有问题呢？应该多做几次样品试试看。
有些成分在不同的溶剂里溶解性能有可能是很不一样的。但以个人的经验来看，直接用流动 ...

hplc中用于样品配制的溶剂组成尽可能接近流动相组成，以避免溶剂效应导致峰变形。当然，不是什么样品都会这样，但大部分情况多少都会有些影响，比较典型的如一些黄酮化合物，另外溶剂峰可能会出现，尤其是短波长测定，且溶剂峰的位置可能不确定，也就是说不一定在最前面，在样品峰后面都有可能，因为溶剂很多时候本身也不一定纯净。 许多化合物在遭遇溶剂效应后峰变形严重，甚至裂分。这不奇怪。
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9楼2009-10-17 09:59:33
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yanling3083

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
yanlingma(金币+5,VIP+0): 11-4 14:49
有可能是药物与乙醇相互作用带出来的峰。
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10楼2009-11-04 14:46:37
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