应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞荧光标记的定量
51/1返回列表
查看: 565  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Airare

金虫 (正式写手)

虫游天下

[交流] 细胞荧光标记的定量

大家好！请教一个问题:
做免疫荧光考察目的蛋白的核质转运。加药后，集聚于细胞核的目的蛋白转运到细胞质中，呈弥散分布（但荧光很明显，就是不像在细胞核中一样聚集成圆点状），这一过程用什么可以做到半定量？用IPP行不？
如果用共聚焦做定量，那么大概怎么操作？（转换为灰度图？再怎么怎么？）；
请各位高手提点建议哦，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
——穿越死亡之门，到我这里来，虽则梦想褪色，岁月集成的果实腐烂掉，但我是永恒的真理，你将再会见我，在你从此岸渡向彼岸的生命航程中...
1楼 2009-10-13 11:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Airare

金虫 (正式写手)

虫游天下
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2009-10-13 11:52:


没做过，能不能把某种蛋白做一系列梯度(当然，这种梯度最好是二倍稀释），
然后标记荧光，然后照相？

然后就把各个梯度的 荧光强度 或 荧光照片直接列到图上。

我见过相关文献，测定胞内某物质的标记荧 ...

多谢讨论哦！不同实验也许可以那么做吧。不过我需要考察的是，同样的细胞用不同的药物处理，使药物作用的目的蛋白不同程度的从细胞核中转运出来，因此想做个定量。因为细胞都是一样的，默认被作用的蛋白的量也是一样的。

现在是得到了药物作用后，目的蛋白不同程度的转运到细胞质中，想量化一样到底转到细胞质的百分比（细胞质荧光/细胞核荧光）多少？
赞一下 回复此楼
——穿越死亡之门，到我这里来，虽则梦想褪色，岁月集成的果实腐烂掉，但我是永恒的真理，你将再会见我，在你从此岸渡向彼岸的生命航程中...
3楼2009-10-13 12:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★
Airare(金币+2,VIP+0):多谢讨论 10-13 12:27
引用回帖:
Originally posted by Airare at 2009-10-13 11:07:
大家好！请教一个问题:
做免疫荧光考察目的蛋白的核质转运。加药后，集聚于细胞核的目的蛋白转运到细胞质中，呈弥散分布（但荧光很明显，就是不像在细胞核中一样聚集成圆点状），这一过程用什么可以做到半定量？ ...

没做过，能不能把某种蛋白做一系列梯度(当然，这种梯度最好是二倍稀释），
然后标记荧光，然后照相？

然后就把各个梯度的 荧光强度 或 荧光照片直接列到图上。

我见过相关文献，测定胞内某物质的标记荧光，就有这么做的，
图是彩色的，很漂亮。如图示。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-13 at 12:13 ]
赞一下(2人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-13 11:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by Airare at 2009-10-13 12:26:


多谢讨论哦！不同实验也许可以那么做吧。不过我需要考察的是，同样的细胞用不同的药物处理，使药物作用的目的蛋白不同程度的从细胞核中转运出来，因此想做个定量。因为细胞都是一样的，默认被作用的蛋白的量也 ...

这个。。我没有经验。。。估计更麻烦！！。。。

实质问题是：
在同一图像内，计算某一区域的不规则图形占 具有某种特点的 全部不规则图形的比例。最好有灰度积分功能。

好像不容易哦！！！

荧光照相后，就拿那个图片去试试那个菌落计数软件吧，好像可以在某一图像内，计算不同图像的面积比例。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-10-13 at 12:36 ]
赞一下 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-10-13 12:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +19 医学老男孩 2026-08-13 43/2150 2026-08-14 13:34 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 13/650 2026-08-14 10:53 by lnjx2024
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭