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做实时定量PCR内参的选择 已有2人参与
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| 最近要做定量PCR,来检测多倍体之间的表达差异,原来打算用18s做内参,但后来越想越不对劲,多倍体形态上差异很大,这些看家基因是不是也有变化,大家给点意见,用哪个基因做内参好? |
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nancysea
金虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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| PCR技术是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。我们实验室用BIODAI测得的扩增曲线起跳值一般在30左右,每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 |
4楼2019-12-20 09:02:08













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