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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于RT-PCR问题 求助 急
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星际浪子8986

铜虫 (初入文坛)

[交流] 关于RT-PCR问题 求助 急

我打算做RT-PCR，可由于穿刺组织量太少，研究员说很难提取RNA，无法做RT-PCR，请教样本要多大才能做啊  如果是石蜡包块组织 可以做RT-PCR吗 具体步骤应该怎么样的？？急死人了 请大家指导一下吧

[ Last edited by amisking on 2009-10-12 at 12:00 ]
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1楼 2009-10-11 18:49:56
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lcx_2008

木虫 (小有名气)
★ ★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1,VIP+0): 10-12 12:00
提取的PNA德量与你的所用的组织的量有关，但是也与你提取RNA过程中RNA的降解有关，RNA很容易降解，如果你的组织量太少，几乎提不到RNA！！
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2楼2009-10-11 20:08:14
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liujunhero

新虫 (文学泰斗)

文献杰出贡献文献杰出贡献
★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
二楼是正确的
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3楼2009-10-11 21:29:13
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djzhangruf

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 10-12 11:59
根据情况确定所需RNA的量确定组织的量 也不宜过多 多的量既不节省实验药品也会带来实验误差  重要的是防止RNA的降解
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4楼2009-10-11 21:39:41
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 10-12 12:00
不能多取一点儿吗
其实体RNA用材料很少就能提出来，注意不要降解就好，最后用少些水溶，你可以试一试的，有些东西不试一试很难说行或不行的
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5楼2009-10-12 08:31:48
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louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by lcx_2008 at 2009-10-11 20:08:14:
提取的PNA德量与你的所用的组织的量有关，但是也与你提取RNA过程中RNA的降解有关，RNA很容易降解，如果你的组织量太少，几乎提不到RNA！！

谢谢
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6楼2010-03-19 09:38:19
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
我觉得很少量就可以提取到RNA，一般30mg就足够了，但是石蜡包埋组织是不行的
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7楼2010-03-19 09:56:23
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shirley7216

木虫 (小有名气)

注意防止RNA 的降解措施，

★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
可以用宝生物的试剂盒，但要根据RNA 的性质决定，比如病毒有POLY（A)，就不能用
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simon
8楼2010-03-19 12:26:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
我做过石蜡块抽RNA做qPCR
沉淀的时候几乎看不到
但实际上最后是能扩出来的
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9楼2010-03-19 19:41:01
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vonsun

金虫 (正式写手)
★
星际浪子8986(金币+1):谢谢参与
20mg组织就够了，用液氮研磨，防止降解，给你推荐一款试剂盒，天津原平皓公司的Easyspin RNA kit.
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10楼2010-03-20 15:00:01
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