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宛辰

木虫 (小有名气)

[交流] 关于包被蛋白的问题

由于我刚涉及到细胞的实验,很多都没听说过,所以想问一下,所谓包被蛋白是不是就是把蛋白以一定浓度放入到细胞培养板中,然后四度过夜就算是包被上?

[ Last edited by 宛辰 on 2009-10-11 at 12:57 ]
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宛辰

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+10,VIP+0):自问自答啊! 10-11 16:57
我终于找到了,有人做了包被FN的对比,我粘过来,希望对大家会有用,呵呵
总共试验了以下方案:
1、50ug/ml,4度过夜;
2、10ug/ml,4度过夜;
3、50ug/ml,室温下放置45分钟至一小时;
4、10ug/ml,37度过夜;
5、1ug/ml,37度过夜。
现在养到了第四天,自我感觉贴壁效果最好的是方案4,而且该方案所用的FN还是方案2用过一次的,我把它回收了又重复利用,已经经过了一次冻融,按理说效果应该下降了不少了,但是它的贴壁时间早,细胞多而且形态比较接近长梭形,还聚集形成了很多集落样的结构

至于溶解分装,我是用灭菌注射用水1ml将其溶解为1mg/ml,然后分装为八支EP管,负二十度保存。
2楼2009-10-11 13:18:52
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宛辰

木虫 (小有名气)

按说明书上说的液体溶解,建议1mg溶在1ml液体中,便于计算和分装。可以根据自己每次需要的量,先把1ml(此时浓度为1mg/ml)的母液分装为100ul左右一支,然后用的时候拿出来稀释。如果你同时试验这些浓度的话可以先把母液稀释到你所需的最浓的浓度,然后从中取出一部分稀释为次浓的,以此类推,得到你你所需的所有浓度的FN。
3楼2009-10-11 13:20:34
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