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LUCINA*

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教关于转染的若干问题

我最近在进行转染,用的是QIAGEN品牌的Attractene转染试剂,体系按照说明书配置的,转染六孔板,结果在WB后发现检不出标签。这个基因是之前师兄探索过的一个基因,表达应该是没有问题的。用了了Abways和Abclonal的一抗都不行。也转过GFP标签显微镜下荧光很低,就是没转进去。后来换了碧云天的lipo6000转染试剂和CST抗体就可以检出来。但是我师兄说他之前用的是Abways的抗体,我现在用这个品牌抗体孵不出就是有问题,怀疑我检出来的就不是那个基因。

而且最近我用CST抗体孵育发现空载也有带(大哭!)

有懂转染的同学解答一下吗(球球)

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LUCINA*

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Glenice Y at 2023-11-03 00:20:39
另外,你说理论上表达没有问题,其实我不太赞同,你可以拿这个沾染的质粒测一下序,看看是否出现移码突变等等情况,这种都可能存在的

谢谢大佬,这个质粒我们也测过序了,没发现有突变,别人转染效果也不太好。后来换了HA标签就好多了。但是也没有别人的表达量高。

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5楼2023-11-15 20:09:32
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