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汕头大学海洋科学接受调剂
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qrf0704

铁虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质为何在酶切缓冲液中出现沉淀

请教各位:我的蛋白是重组His蛋白,用Ni柱纯化后采用脱盐柱脱盐并且置换为酶切缓冲液,放置1天后会出现少量的沉淀,用重组牛肠激酶酶切后,则会出现大量的沉淀,我的蛋白损失很多,请问是什么原因啊?酶切缓冲液就是25 mM Tris-HCl,50 mM NaCl, 2 mM CaCl2,谢谢啦!!!
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09021122

木虫 (正式写手)

酶切时的温度变化是多少要考虑,还有就是酶的活性程度是不是很高,你那个蛋白是不是很本身就有问题
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
2楼2009-10-09 12:56:03
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qrf0704

铁虫 (小有名气)

就是一直在室温下进行酶切,酶的活性也很好,蛋白是重组蛋白,经过NI柱纯化后的
3楼2009-10-09 14:45:05
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